新學(xué)期開學(xué)*，現(xiàn)貨供應(yīng)：A9 細(xì)胞,小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞價格，詳細(xì)信息：

【細(xì)胞生長】：貼壁生長或懸浮生長
【細(xì)胞形態(tài)】：上皮樣、多形態(tài)細(xì)胞樣等形態(tài)
【規(guī)格】：5×1000000cells/瓶
【包裝】：內(nèi)層無菌自封袋、防壓泡沫盒、外層防壓保溫氣泡袋、說明書。
【價格】：電詢/詢價。（或）
【發(fā)票】：增票/普票
【細(xì)胞傳代】：1:3 傳代
【細(xì)胞活力】：90％（Viability by Trypan Blue Exclusion）
【細(xì)胞檢測】：細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
【細(xì)胞凍存】：液氮凍存（基礎(chǔ)培養(yǎng)基+10%DMSO+20%FBS）

新學(xué)期開學(xué)*，現(xiàn)貨供應(yīng)：“A9 細(xì)胞,小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞價格 ”優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品后，在倒置顯微鏡下觀察整個細(xì)胞生長情況：
如果細(xì)胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，留10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)。
如果細(xì)胞已長滿（達80-90%），即可進行傳代，具體步驟如下：
1）棄去培養(yǎng)液，用PBS洗1-2次。
2）向瓶內(nèi)加入1.0-2.0ml*液，再倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺，吸取*，加含有6ml含10%的血清的培養(yǎng)液，輕輕吹打細(xì)胞。
3）加入等量的培養(yǎng)液，輕輕吹打混勻后吸出一半，分到新別的地方培養(yǎng)。

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新學(xué)期開學(xué)*，現(xiàn)貨供應(yīng)；技術(shù)相關(guān)問答：
1、培養(yǎng)細(xì)胞時應(yīng)使用5 % 或10% CO2？或根本沒有影響？
一般培養(yǎng)基中大都使用HCO3-/CO32-/H+ 作為pH 的緩沖系統(tǒng)， 而培養(yǎng)基中NaHCO3 的含量將決定細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用的CO2 濃度。當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 含量為每公升3.7 g 時，細(xì)胞培養(yǎng)時應(yīng)使用10 % CO2；當(dāng)培養(yǎng)基中NaHCO3 為每公升1.5 g 時， 則應(yīng)使用5 % CO2 培養(yǎng)細(xì)胞。
2、何時須更換培養(yǎng)基？
視細(xì)胞生長密度而定， 或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。
3、培養(yǎng)基中是否須添加抗生素？
除于特殊篩選系統(tǒng)中外， 一般正常培養(yǎng)狀態(tài)下， 培養(yǎng)基中不應(yīng)添加任何抗生素。
4、附著性細(xì)胞繼代時所使用之trypsin-EDTA 濃度？應(yīng)如何處理？
一般使用之trypsin-EDTA 濃度為0.05% trypsin-0.53mMEDTA.4 Na。*次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中， 保存于–20 ℃，避免反復(fù)冷凍解凍造成trypsin 之活性降低， 并可減少污染之機會。
5、懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理？
一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中， 稀釋細(xì)胞濃度即可， 若培養(yǎng)液太多時， 可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高， 直到無法容納為止。分瓶時取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶， 加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度， 重復(fù)前述步驟即可。
6、欲將一般動物細(xì)胞離心下來，其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速？
欲回收動物細(xì)胞， 其離心速率一般為300xg （約1,000rpm），5 - 10 分鐘， 過高之轉(zhuǎn)速， 將造成細(xì)胞死亡。
7、細(xì)胞之接種密度為何？SHZ-88大鼠乳腺癌細(xì)胞
依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無法生長之一重要原因。
8、細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何？
動物細(xì)胞冷凍保存時zui常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5 - 10 %DMSO （dimethyl sulfoxide） 和90 - 95 % 原來細(xì)胞生長用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意：由于DMSO 稀釋時會放出大量熱能， 故不可將DMSO 直接加入細(xì)胞液中， 必須使用前先行配制完成。
9、DMSO 之等級和無菌過濾之方式為何？SHZ-88大鼠乳腺癌細(xì)胞
a D2650）， 其本身即為無菌狀況， *次開瓶后應(yīng)立即少量分裝于無菌試管中， 保存于4°C， 避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO 之裂解而釋出有害物質(zhì)， 并可減少污染之機會。若要過濾DMSO， 則須使用耐DMSO 之Nylon 材質(zhì)濾膜。
10、冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase *儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase*儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
11、細(xì)胞欲冷凍保存時， 細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度？
冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x106 cells/ml vial， 融合瘤細(xì)胞則以5x106 cells/ml vial 為宜。
12、應(yīng)如何避免細(xì)胞污染？
細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法。
13、如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時，應(yīng)如何處理？SHZ-88大鼠乳腺癌細(xì)胞
加入相應(yīng)抗生素。直接滅菌后丟棄之。
14、支原體（mycoplasma） 污染的細(xì)胞， 是否能以肉眼觀察出異狀？
不能。除極有經(jīng)驗之專家外，大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株，無法以其外觀分辨之。
15、支原體污染會對細(xì)胞培養(yǎng)有何影響？
支原體污染幾乎可影響所有細(xì)胞之生長參數(shù)， 代謝及研究之任一數(shù)據(jù)。故進行實驗前，必須確認(rèn)細(xì)胞為mycoplasma-free，實驗結(jié)果之?dāng)?shù)據(jù)方有意義。
26、CO2 培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔？
定期（至少每兩周一次） 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。
27、為何培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中， 顏色會偏暗紅色， 且pH值會越來越偏堿性？
培養(yǎng)基保存于4 ℃ 冰箱中， 培養(yǎng)基內(nèi)之CO2 會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑（通常為phenol red） 的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果， 將造成細(xì)胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時， 可以通入無菌過濾之CO2， 以調(diào)整pH 值。