Aureobasidin A (AbA) 金擔(dān)子素A/短梗霉素A
——Clontech/Takara 酵母菌/真菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)選擇性抗生素/酵母單雜交/雙雜交研究
搜索關(guān)鍵詞：選擇性抗生素；酵母菌轉(zhuǎn)化系統(tǒng)【釀酒酵母、粟酒裂殖酵母、念珠菌】；真菌轉(zhuǎn)化系統(tǒng)【構(gòu)巢曲霉、黑曲霉】；酵母單雜交/雙雜交；AUR1基因；AURA基因；IPAC合成酶；AUR1-C突變基因；
基本描述：
金擔(dān)子素A（Aureobasidin A，AbA），也稱為短梗霉素A，一種來(lái)源于絲狀真菌Aureobasidium pullulans No. R106的環(huán)酯肽類抗真菌抗生素，在較低濃度（0.1-0.5μg/ml）下即可對(duì)酵母菌產(chǎn)生毒性，對(duì)該抗生素敏感的真菌包括：釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae），粟酒裂殖酵母（Schizosaccharomyces pombe）、光滑念珠菌（Candida glabrata）、構(gòu)巢曲霉（Aspergillus nidulans）和黑曲霉（Aspergillus niger.）。金擔(dān)子素AbA通過(guò)抑制真菌生長(zhǎng)所依賴的肌醇磷脂酰神經(jīng)酰胺合成酶（Inositol phosphorylceramide (IPC) synthase）活性，阻礙神經(jīng)酰胺到肌醇磷脂酰神經(jīng)酰胺的合成，導(dǎo)致鞘脂類物質(zhì)的合成量不足，細(xì)胞膜破裂，進(jìn)而殺死菌株。研究發(fā)現(xiàn)，來(lái)自釀酒酵母菌的AUR1和構(gòu)巢曲霉的AURA基因，兩者具有同源性，都能夠編碼IPC合成酶，對(duì)這兩種基因的點(diǎn)突變，也都賦予菌株對(duì)AbA產(chǎn)生很強(qiáng)的抗性，比如：突變基因AUR1-C。
AbA用作選擇性標(biāo)記的應(yīng)用和優(yōu)勢(shì)：
- 酵母轉(zhuǎn)化研究中，金擔(dān)子素A（AbA）是一種非常有效的選擇性標(biāo)志；
- 使用上基本不需優(yōu)化條件，且創(chuàng)造極低背景。AbA抗性是酵母雙雜交研究中理想的報(bào)告子，兼容于攜帶相應(yīng)抗性的酵母單雜交/雙雜交系統(tǒng)，并提供良好的篩選結(jié)果。
攜帶AbA抗性基因（AUR1-C）的商業(yè)化載體：
- 大腸桿菌-酵母菌穿梭載體/大腸桿菌-曲霉穿梭載體（shuttle vector）
簡(jiǎn)單描述：pAUR載體系統(tǒng)包含六種大腸桿菌-酵母菌穿梭載體，每一種特別改造用于釀酒酵母、粟酒裂殖酵母或者構(gòu)巢曲霉，這些載體都涵蓋一個(gè)新型的藥物抗性選擇性標(biāo)志（金擔(dān)子素Aureobasidin A抗性），使得酵母菌或絲狀真菌具有此抗性。
【各載體及其特點(diǎn)詳見(jiàn)Mangkangbio】
- 酵母報(bào)告基因載體（yeast reporter vector）
載體名稱 | 特點(diǎn) | 備注 |
pAbAi Vector | 用于單雜交（one-hybrid）實(shí)驗(yàn)的酵母報(bào)告載體，可用來(lái)鑒定和分類DNA結(jié)合蛋白。特別設(shè)計(jì)兼容于Matchmaker Gold 酵母單雜交篩選系統(tǒng)，順式作用元件（靶向序列）可插入MCS用作誘餌以篩選GAL4 AD/cDNA融合文庫(kù)；目標(biāo)蛋白-DNA的相互作用驅(qū)動(dòng)AUR1-C抗性基因表達(dá)，從而能篩選到AbA抗性酵母； | Matchmaker Gold 酵母單雜交系統(tǒng) |
p53-AbAi Vector | 酵母報(bào)告載體，配合Matchmaker Gold 酵母單雜交篩選系統(tǒng)的陽(yáng)性對(duì)照載體；含p53結(jié)合序列（順式作用元件）；AbA抗性基因AUR1-C的表達(dá)受GAL4 AD-p53與p53結(jié)合序列的相互作用而誘發(fā)；p53-AbAi在酵母細(xì)胞內(nèi)不能游離繁殖，僅當(dāng)整合進(jìn)入宿主染色體才可以穩(wěn)定存在，通過(guò)載體上的URA3基因和酵母菌株上的非功能ura3-52 locus發(fā)生同源重組以實(shí)現(xiàn)整合。另，含Col E1復(fù)制起始子和AmpR，可實(shí)現(xiàn)大腸桿菌內(nèi)的擴(kuò)增和復(fù)制。 |
基本特性：
- 同義名：短梗霉素A
- 分子式：C60H92N8O11
- 分子量：1100 Da
- 純度：≥95%
- 熔點(diǎn)：155-157℃
6） 溶解性：不溶于水，易溶于甲醇、乙醇（0.5-5mg/ml）
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品牌 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） | 貨期 |
Clontech | 630466 | Aureobasidin A for Yeast Two-Hybrid Studies【1mg/ml in methanol 特殊包裝，經(jīng)濟(jì)實(shí)惠】 | 1mg | 950 | 現(xiàn)貨 |
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— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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抗生素 Aureobasidin A （AbA） 金擔(dān)子素A/短梗霉素A
抗生素 Aureobasidin A （AbA） 金擔(dān)子素A/短梗霉素A
