貨號(hào):WT-E5595【人周期素依賴性激酶7(CDK7)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)明書(shū)】ELISA試劑盒基本操作注意事項(xiàng)
加樣:
在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可濺出,不可產(chǎn)生氣泡。
保溫
抗原抗體完成反應(yīng)的保溫過(guò)程稱為溫育(incubation)。
ELISA屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育?
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。【人周期素依賴性激酶7(CDK7)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)明書(shū)】
保溫方式:ELISA儀器附有特制的電熱塊,水浴。
若用保溫箱:ELISA板放在濕盒內(nèi),在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。反應(yīng)板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。
室溫溫育的反應(yīng),操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書(shū)的要求控制溫育。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn),一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。
洗滌
洗滌在ELISA過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟,但卻也決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。
ELSIA洗滌:達(dá)到分離游離的和結(jié)合的酶標(biāo)記物的目的。【人周期素依賴性激酶7(CDK7)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)明書(shū)】
清除殘留在板孔中游離的物質(zhì),以及非特異性地吸附的干擾物質(zhì)。聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的,而在洗滌時(shí)又應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來(lái)。
可以說(shuō)在ELISA操作中,洗滌是zui主要的關(guān)鍵技術(shù)。
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