英文簡稱:SK-N-FI細胞
產(chǎn)品名稱:腦神經(jīng)母細胞瘤細胞
規(guī)格:T25
形態(tài)特性:上皮樣
生長特性:貼壁生長
特征特性:
培養(yǎng)條件:DMEM O.1 mM Non-Essential Amino Acids (NEAA) fetal bovine serum to a final conCA-ntration of 10%
傳代方法: 1:4傳代,每周換液2次
貨號:CS-X63663
公司產(chǎn)品僅用于科研公司有大量的優(yōu)質(zhì)細胞,還提供細胞的全程后期服務(wù),可以向?qū)I(yè)人士咨詢詳細的細胞培養(yǎng)條件,凍存方法,及相關(guān)培養(yǎng)技術(shù)。
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
細胞培養(yǎng)操作規(guī)范:
主要功能:
(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
(3)與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關(guān)。
生理變化:
(1)主動脈硬化。
(2)主動脈瘤
(3)主動脈鈣化。
基本特性:
(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色。
(3)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
(4)每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin免疫熒光染色驗證。
(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
熱帶假絲酵母拉丁屬名: Salmonella enterica subsp. enterica serotype Eastbourne
腸沙門氏菌腸亞種伊斯特本血清型注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
相思根瘤菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母拉丁屬名: Pythium dissotocum
寬雄腐霉拉丁屬名: Streptomyces cinereohygroscopicus
燼灰吸水鏈霉菌拉丁屬名: Paenibacillus humicus
腐殖質(zhì)類芽胞桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
葡萄座腔菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
松鼠葡萄球菌松鼠亞種拉丁屬名: Aspergillus oryzae
米曲霉拉丁屬名: Syncephalastrum racemosum
總狀共頭霉拉丁屬名: 凍干粉 克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)(陽性)
凍干粉 克羅諾桿菌屬(阪崎腸桿菌)(陽性) 拉丁屬名: Penicillium glabrum
光滑青霉拉丁屬名: Escherichia coli
大腸埃希氏菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
微黃棒桿菌注意事項: 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
灰離褶傘(松毛菇)拉丁屬名: Aspergillus usamii
SK-N-FI細胞有絲分裂控制樣蛋白DIS3L抗體鹽金剛乙(標準品) Yohimbine HCl
有絲分裂控制蛋白樣DIS3L2抗體鹽(標準品) Phentolamine mesilate
DOM3Z蛋白抗體鹽肼屈(標準品) Phentolamine mesilate
蓬亂蛋白2抗體鹽卡替洛爾(標準品) Vemurafenib,PLX 4032
磷化蓬亂蛋白2抗體鹽(標準品) Praeruptorin E
轉(zhuǎn)錄下調(diào)蛋白1抗體鹽喹那普利(標準品) Praeruptorin A
脫氫酶/還原酶家族成員2抗體鹽拉貝洛爾(標準品) trans-Zeatin
牙本質(zhì)磷蛋白抗體鹽雷莫司瓊(標準品) Dipotassium tetrachloroplatinate
Dermokine β蛋白抗體鹽(標準品) Cycloastragenol
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡,co2孵箱。
1.2 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復(fù)蘇培養(yǎng)從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細胞傳代 原代培養(yǎng)的細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態(tài)的觀察在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細胞的計數(shù) 常規(guī)消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數(shù)板四角大方格細胞數(shù),按公式計算出細胞數(shù)。細胞數(shù)/ml原液=(四方格細胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率指數(shù)生的細胞,以0.25%消化成單細胞懸液,計數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數(shù)已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數(shù)/接種細胞數(shù)) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線取指數(shù)生的細胞用消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機取3孔,計數(shù)每孔細胞的數(shù)目并計算平均值。連續(xù)計數(shù)10d,繪制細胞生長曲線。