產(chǎn)品名稱:Anti-DYKDDDDK Affinity Beads
1.產(chǎn)品介紹
Flag標(biāo)簽是一個(gè)由八個(gè)親水氨基酸組成的多肽片段,定位在融合蛋白表面,因此更易與抗體結(jié)合以及被腸激酶分解。Anti-DYKDDDDK Affinity Beads是以抗flag(DYKDDDDK)抗體為親和配體,一步純化原核、酵母或哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)的flag標(biāo)簽融合蛋白。Anti-DYKDDDDK Affinity Beads以4%瓊脂糖凝膠為基質(zhì),雜蛋白非特異性結(jié)合少,可用于flag標(biāo)簽融合蛋白的純化和免疫沉淀(IP)。
實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.產(chǎn)品僅用于科研對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
公司主營產(chǎn)品:
生化試劑:抗生素、維生素、培養(yǎng)基、染色劑、酶/輔酶、碳水化合物、分離試劑、緩沖試劑、核酸及衍生物、氨基酸/蛋白質(zhì)等其它生化試劑,我們提供各種品牌。
分子生物學(xué):核酸電泳、DNA Marker、克隆表達(dá)、PCR/Q-PCR、RT-PCR、基因組提取、質(zhì)粒提取、RNA提取、DNA純化回收、核酸純化相關(guān)試劑。
細(xì)胞培養(yǎng):血清、培養(yǎng)基、平衡鹽溶液、輔助添加試劑、細(xì)胞檢測(cè)試驗(yàn)。
蛋白質(zhì)研究:蛋白電泳、蛋白提取、蛋白純化、蛋白定量、組織/蛋白染色。
免疫學(xué):抗體、免疫組化、ELISA、免疫印跡WB。
C-erbB-4/HER4/erbB-4 (epidermal growth factor receptor4) c-erbB-4癌基因抗原米氏酮 98%磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體
CFTR(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator) 囊性纖維化跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子抗原4-硝基 CP磷酸化周期素依賴性激酶2抗體
CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原4-硝基 98%磷酸化周期檢測(cè)點(diǎn)激酶1抗體
CGA(Chromogranin A) 嗜鉻粒素A抗原硝氮黃 Indicator磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體
CGB(Chromogranin B) 嗜鉻粒素B抗原乙基黃原酸 AR,95%磷酸化α-連環(huán)蛋白抗體
ChRM1(muscarinic acetylcholine receptor) 蕈堿型乙酰受體M1抗原酸酯 ≥99%, FCC周期素E2抗體
ChRM3 peptide 蕈堿型乙酰受體M3抗原酸酯 98%磷酸化鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶CAMK2B/D/G抗體
CK18(Cytokeratin 18) 角蛋白18(多肽)酸酯 Standard for GC,≥99.5%(GC)腫瘤易感候選基因3抗體
CK18 peptide 角蛋白18多肽抗原月桂酸鈉 98%磷酸化腫瘤易感候選基因3抗體
CK18(Cytokeratin 18) 角蛋白18抗原(C端)2-硫代酸 98%磷酸化CREB-1抗體
CK14/17/42/10 peptide 角蛋白14抗原間二甲苯 99.0%磷酸化CREB-1抗體
CK16(Cytokeratin 16) 角蛋白16抗原2,2'-雙噻吩 98%磷酸化周期素依賴性激酶6抗體
CK17(Cytokeratin 17) 角蛋白17抗原3-丁基噻吩 98%原癌基因CBL2抗體
CK19 角蛋白19多肽抗原2-溴-3-己基噻吩 98%磷酸化原癌基因CBL2抗體
CK1/8/19 (Cytokeratin1/8/19; Keratin 1/8/19)peptide 角蛋白1/8/19抗原2-溴-3-十二烷基噻吩 95%β鏈接素相互作用蛋白1抗體
Anti-DYKDDDDK Affinity Beads檸檬兩面神菌Janibacter│melonis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
鮑曼不動(dòng)桿菌Acinetobacter│baumannii 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
青霉屬Penicillium│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
T.5796E7資源名稱: 傷寒沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
弧菌Vibrio│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
具柄擬青霉Paecilomyce│stipitatus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
艾比嗜鹽堿紅菌Natronorubrum│aibiense 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
果生鏈核盤菌Monilinia│fructigena Honey 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品川芎提取,液體
茯苓Wolfiporia│cocos 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品