大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA檢測試劑盒 說明書 北京現(xiàn)貨
試驗原理:
大鼠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA檢測試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nèi)進行檢測。先將待測物質和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。
安全性
1)避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2)實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
樣品收集、處理及保存方法
1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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實驗規(guī)則須知:
1、要保證移液槍的準確性,誤差不能超過2%??捎盟碗娮犹炱竭M行確定。但有專業(yè)人員進行矯正
2、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。吸取不同的液體后,要更換槍頭。即使是吸取標準品時
3、要在實驗前1小時將試劑盒從冰箱中取出,使各種試劑都恢復到室溫,以使結果更穩(wěn)定
4、實驗時,要使底物避光保存
5、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準確
6、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差
7、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去
8、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能
9、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發(fā)。
10、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加*。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
11、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可*保存。
12、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
13、檢測前,要打開酶標儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
14、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。
15、待檢樣品要澄清,否則會影響結果。
16、溫浴時間應遵守試劑盒規(guī)定。
17、應盡量做雙孔實驗,這樣才能保證數(shù)據(jù)的準確性。
18、對結果有疑問的樣品要用其它方法進行確證
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◇質量保證:
適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本,靈敏度*,多年專業(yè)酶免服務,我們保證對所售任何產(chǎn)品一概負責到底,每一份實驗結果都真實可靠!
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