訂購信息:
產(chǎn)品名稱:狐貍源性成分(Vulpes)核酸檢測試劑盒
規(guī)格:50T
編號:BH-P96954
分類:熒光PCR法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
準備物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說明書 1份
使用及效果:
PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。
GIF Others Human Gasic irinsic factor / GIF 細胞裂解液 (陽性對照) 泊甙Etoposide>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
Saos-2成骨肉瘤細胞 Saos-2 human osteosarcoma cells McCOY's 5A+15%FBS泊甙()EtoposideHPLC>98%,
SF126細胞,腦瘤細胞 表皮葡萄球菌 腎上皮細胞總RNAHREpiC NA(企標)Exemestane>99%,BR,可用于細胞培養(yǎng)
RK1(大鼠腎細胞) 5×106cells/瓶×2醋酸艾塞那肽Exenatide Acetate/Exendin-4度98%以上
FaDu(咽鱗癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0299NCI-H460(肺癌細胞)5×106cells/瓶×2 兔晶體上皮細胞永生系;N/N1003A(RLE)Finasteride>99%,BR
小鼠海馬趾神經(jīng)元MN-h光萼野百合堿()HPLC≥98%,Usaramine
CGA Others Human FSH alpha / TSH alpha / CGA 細胞裂解液 (陽性對照) L-天鈉鹽>99%,BRL-Aspartic acid salt
永生化表皮細胞;HaCaT花旗素,二氫槲皮素>98%Taxifolin
大鼠肝細胞;BRL 3A 膽管細胞型肝癌細胞,HCCC-9810細胞 C26細胞,小鼠結(jié)腸癌花旗素,二氫槲皮素()HPLC≥98%,Taxifolin
6-10B, 鼻咽癌細胞系 Human-d7美國進口Flutamide-d7
狐貍源性成分(Vulpes)核酸檢測試劑盒豬腎細胞;PK(15)CytochalasinB胞菌素B1公斤BR,600u/mg,豬胰
大鼠肺細胞;WL1 胃腺癌細胞,SGC-7901細胞 GR細胞,鼠成纖維細胞系#NAME 2-inoneolinqccrboxcldqhydq 2470-96-
Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞 MouseCinnamonoil桂油25克CP
PCSK1 Others Human PCSK1 / NEC1 細胞裂解液 (陽性對照) 質(zhì)粒提取試劑盒10片/箱
腸平滑肌細胞cDNAHISMC cDNA(D-核糖)
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。