小鼠激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒的特異性的說明:
特異性一:
特異性一般指試劑盒出現(xiàn)假陽性或假陰性的概率。特異性不高、穩(wěn)定性差和重復(fù)性差、樣本前處理方法不理想均會導(dǎo)致試劑盒假陽性或假陰性的出現(xiàn)。作為篩選方法,假陰性比假陽性對用戶產(chǎn)生的經(jīng)濟影響大,因此廠家往往允許有一定的假陽性,對假陰性控制較嚴(yán)。選取一批陰性樣本,通過添加已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品測回收率,可初步判定試劑盒的特異性高低,回收率過低,容易出現(xiàn)假陰性,回收率超過100%,容易出現(xiàn)假陽性。也可通過測定已知陰陽性樣本,通過判定陰陽性符合率來測定試劑盒的特異性。
特異性二:
特異性的另一層含義是指對同類物質(zhì)的交叉反應(yīng)率。某些抗體除對某一專一物質(zhì)起反應(yīng)外,還對同類結(jié)構(gòu)類似的物質(zhì)有反應(yīng)。對同類物質(zhì)均有反應(yīng)的抗體可開發(fā)出多殘留或總殘留試劑盒,如磺胺類和氟喹諾酮類多殘留試劑盒,對于只要求檢測總殘留的項目來說,可大大節(jié)省成本和操作時間。無論專一試劑盒還是多殘留試劑盒均要求對無關(guān)物質(zhì)無交叉反應(yīng)、交叉反應(yīng)極低、或在目標(biāo)樣本中沒有無關(guān)交叉反應(yīng)物質(zhì),以降低試劑盒的假陽性。
小鼠激素敏感性脂肪酶(HSL)ELISA試劑盒的詳細說明:
1.試劑盒保存:較長時間不用時的控制溫度為:-20℃;頻繁使用時的控制溫度為:2-8℃。
2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3.中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準(zhǔn)。
4.剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正?,F(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。需要而未提供的試劑和器材有:①標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀;②高速離心機;③電熱恒溫培養(yǎng)箱;④干凈的試管和Eppendof管。
5.系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭,一次檢測樣品較多時,用多通道移液器。
6.蒸餾水,容量瓶等,例:
Ⅰ.酶聯(lián)板(Assay plate):一塊(96孔);
Ⅱ.標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶;
Ⅲ.樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶;
Ⅳ.生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶;
Ⅴ.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶;
Ⅵ.生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100);
Ⅶ.辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100);
Ⅷ.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶;
Ⅸ.濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍;
Ⅹ.終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
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