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本試劑盒用于測定血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶TXB2犬血栓素B2的含量。
商品屬性:
產(chǎn)品名稱 | TXB2犬血栓素B2elisa試劑盒 | 英文名稱 | TXB2 ELISA Kit |
貨號 | CS-4337E | 規(guī)格 | 48T/96T |
實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中TXB2犬血栓素B2。用純化的TXB2犬血栓素B2抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加TXB2犬血栓素B2,再與 HRP 標記的TXB2犬血栓素B2抗體結(jié)合,形成抗體抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的TXB2犬血栓素B2呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中TXB2犬血栓素B2濃度。
檢測原理:
1. 抗原-抗體反應(yīng)
ELISA的基礎(chǔ)是抗原-抗體反應(yīng)。抗原是一種能夠與抗體結(jié)合的物質(zhì),而抗體則是免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的蛋白質(zhì),能夠識別并結(jié)合抗原??乖?/span>-抗體結(jié)合是高度特異的,因此ELISA能夠準確地檢測樣本中的抗原或抗體。
2. 酶聯(lián)免疫吸附試驗
TXB2犬血栓素B2elisa試劑盒在ELISA中,抗原或抗體被吸附在固相載體表面。常用的固相載體包括聚苯乙烯、尼龍等。載體表面經(jīng)過特殊處理,可以增強其與抗原或抗體的結(jié)合能力。將酶標記的二抗加入反應(yīng)體系中,二抗能夠與抗原或抗體結(jié)合,形成酶標抗原-抗體復(fù)合物。
3. 底物顯色反應(yīng)
在加入底物后,酶標抗原-抗體復(fù)合物與底物發(fā)生顯色反應(yīng),產(chǎn)生顏色變化。底物可以是顯色劑,也可以是熒光染料。顯色反應(yīng)的強度與抗原-抗體復(fù)合物的量成正比,因此可以通過測量光密度值來定量分析樣本中的抗原或抗體。
4. 終止反應(yīng)
顯色反應(yīng)持續(xù)一定時間后,需要加入終止液終止反應(yīng)。終止液可以使酶失活,停止顯色反應(yīng)。終止液一般是酸或堿溶液。
5. 檢測與分析
終止反應(yīng)后,將固相載體放入多功能酶標儀中測量各孔的光密度值。通過標準曲線可以得出樣本中抗原或抗體的濃度。標準曲線是通過檢測已知濃度的標準品繪制而成的。
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注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在 5 分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標準品孔一孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。