1．科研beckman離心管平衡時(shí)，天平*使用而沒(méi)有進(jìn)行校對(duì)，對(duì)稱(chēng)放置的離心管不平衡并且超過(guò)了0．1～ 1g。

2．beckman離心機(jī)科研beckman離心管在裝樣時(shí)，因樣品液束裝滿(mǎn)或離心管帽沒(méi)有擰緊密封，在離心過(guò)程中離心腔內(nèi)的高真空狀態(tài)造成離心管抽扁、破裂和樣品液外溢，造成轉(zhuǎn)子不平衡而發(fā)生軸彎曲或斷軸事故。

3．當(dāng)原樣品的比重不等于配平液的比重時(shí)，轉(zhuǎn)子動(dòng)平衡失調(diào)而發(fā)生事故。

4．使用水平轉(zhuǎn)子時(shí)，不細(xì)心將吊桶的序號(hào)與水平轉(zhuǎn)子主體的序號(hào)裝錯(cuò)，影響轉(zhuǎn)子的動(dòng)平衡。

5．鋁合金離心管帽與不銹鋼離心管帽混用(兩者比重不同)而發(fā)生事故。

6．離心管帽內(nèi)橡膠密封環(huán)和轉(zhuǎn)子蓋橡膠密封環(huán)使用不當(dāng)和消毒不當(dāng)，如*使用內(nèi)部斷裂和固高溫消毒r使用干燥箱烘烤)等處理而老化龜裂、失去密封作用等，使樣品在高速運(yùn)轉(zhuǎn)時(shí)外溢，從而使轉(zhuǎn)子在不平衡狀態(tài)下運(yùn)行。

7．對(duì)予各種材料的離心管，使用前沒(méi)能很好地了解廠家要求的離心管使用范圍和消毒方法，采用化學(xué)溶劑和不適當(dāng)?shù)南疽禾幚恚斐呻x心管在運(yùn)行中溶脹、破裂而發(fā)生事故。

8．由予工作中粗心大意，轉(zhuǎn)子蓋沒(méi)有擰緊或是將轉(zhuǎn)子蓋和轉(zhuǎn)子柄互換，造成螺扣不吻合，當(dāng)開(kāi)機(jī)運(yùn)行時(shí)，轉(zhuǎn)子蓋拋出而發(fā)生嚴(yán)重的斷軸事故。 

beckman離心機(jī)操作規(guī)程

    1.臺(tái)式高速離心機(jī)的工作臺(tái)應(yīng)平整堅(jiān)固，工作間應(yīng)整齊清潔，干燥并通風(fēng)良好。

    2.打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)，批示燈亮。

    3.關(guān)電源開(kāi)關(guān)。

    4.開(kāi)啟離心蓋，將內(nèi)腔及轉(zhuǎn)頭擦拭干凈。

    5.裝放稱(chēng)量一致的試管。

    6.關(guān)閉離心蓋。

    7.設(shè)定定時(shí)

    8.打開(kāi)電源開(kāi)關(guān)

    9.調(diào)節(jié)調(diào)速旋鈕置于所需轉(zhuǎn)速。

    10.每次停機(jī)前。必須將調(diào)速旋鈕置于小位置。定時(shí)器置零。再關(guān)電源開(kāi)關(guān)。

    11.擦試內(nèi)腔及轉(zhuǎn)頭。關(guān)閉離心蓋。

beckman高速離心機(jī)維護(hù)保養(yǎng)

    1.離心蓋上不要放置任何物質(zhì)，每次使用完畢，務(wù)必清理內(nèi)腔和轉(zhuǎn)頭。

    2.臺(tái)式高速離心機(jī)如較長(zhǎng)時(shí)間未使用，在使用前應(yīng)將離心機(jī)蓋開(kāi)啟一段時(shí)間，干燥內(nèi)腔。

    3.電機(jī)的碳刷在使用3000小時(shí)后，應(yīng)及時(shí)更換，以免磨損整流子。

    4.臺(tái)式高速離心機(jī)經(jīng)*使用，磨損屬正常現(xiàn)象

制備型超高速離心機(jī)的幾種分離方法：
    A.差速離心：逐次增加離心力，每次可沉降樣品溶液中的一些組份。
    差速離心是一種常用的方法。在這種方法中，離心管在開(kāi)始時(shí)裝滿(mǎn)了均一的樣品溶液。通過(guò)在一定速度下一定時(shí)間的離心后，就可得到兩個(gè)部份：沉淀和上清液。
    通常在次離心時(shí)把大部分不需要的大粒子沉降去掉。這時(shí)所需的組份大部分仍留在上清液中。然后將收集到的上清液以更高速度離心，把所需的粒子沉積下來(lái)。離心的時(shí)間要選擇得當(dāng)，使大部份不需要的更小的粒子仍留在上清液中。對(duì)于得到的沉淀和上清液可以進(jìn)行進(jìn)一步的離心，直到達(dá)到所需要的分離純度為止。
    差速離心的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單，但分離純度不高。
    B.密度梯度離心法：可以同時(shí)使樣品中幾個(gè)或全部組份分離，具有很好的分辨率。
    (1)速率區(qū)帶法(ratezonal)：
    根據(jù)樣品中不同粒子所具有的不同的尺寸大小及沉降速度(S)。大致步驟如下：
    在離心管中裝入密度梯度溶液，溶液的密度從離心管頂部至底部逐漸增加(正梯度)。
    將所需分離的樣品小心地加至密度梯度溶液的頂部。樣品在梯度溶液表面形成一負(fù)梯度。
    由于不同大小的粒子在離心力作用下，在梯度中移動(dòng)的速度不一樣，所以經(jīng)過(guò)離心后會(huì)形成幾條分開(kāi)的樣品區(qū)帶。
    注意：樣品粒子的密度必須大于梯度液注中任一點(diǎn)的密度。離心過(guò)程必須在區(qū)帶到達(dá)管子底部前停止。
    (2)等密度離心法(isopycnic)：
    根據(jù)粒子的不同密度來(lái)分離。離心過(guò)程中，粒子會(huì)移至與它本身密度相同的地方形成區(qū)帶。
    密度樣度的選擇要使梯度的范圍包括所有待分離粒子的密度。樣品可以在密度梯度液粒上面或均勻分布在密度梯度中。經(jīng)離心后，樣品粒子達(dá)到它們的平衡點(diǎn)。
    注意：平衡后粒子的分離*由其密度決定，與時(shí)間無(wú)關(guān)，此時(shí)再改變離心轉(zhuǎn)速，只能改變區(qū)帶的相對(duì)位置。
    密度梯度分析法
    (1)梯度介質(zhì)性質(zhì)與選擇：
    A、應(yīng)具備的性質(zhì)： 
    梯度物質(zhì)的選擇原則是滿(mǎn)足分離方法的基本要求，一個(gè)理想的密度材料標(biāo)準(zhǔn)它應(yīng)是：
    所形成的溶液密度應(yīng)包括所需要的密度范圍。
    具有某些性質(zhì)，如折射率，據(jù)此可測(cè)定它的濃度。
    所形成的溶液粘度低。
    不損傷所分離的樣品。
   離心分離后容易除去。
    不妨礙分離積分的分析。
    B、常用介質(zhì)種類(lèi)：
    表一、常用梯度材料在20℃密度
    B.梯度介質(zhì)應(yīng)用范圍：
    表二、等密度梯度介質(zhì)的應(yīng)用
    表三、各種大分子在蔗糖梯度液中的大約密度
    (2)、梯度溶液的準(zhǔn)備：
    計(jì)算,稀釋
    (3)梯度形狀
    梯度形狀分：線型、等速型、階梯型、平坦型、陡峭型指數(shù)梯度。
    梯度形狀對(duì)于分離是否成功非常重要：
    常用的是線型梯度，適用于分離蛋白質(zhì)、酶、激素、核糖體亞基和一些植物病毒;等速型適用于分離脂蛋白和一些需上浮分離樣品;不連續(xù)或階梯型梯度適用于分離整細(xì)胞、亞細(xì)胞組分以及純化一些哺乳類(lèi)動(dòng)物病毒或昆蟲(chóng)病毒。等速梯度以及長(zhǎng)液柱可增進(jìn)分離能力，適用于分離核糖體亞基、多核糖體及植物病毒。
    B.梯度柱制備：
    梯度液柱可以用手工或梯度儀制備
    半注法：
    為縮減離心時(shí)間，或分離樣品較少可用半注法：下半管鋪置梯度介質(zhì)，中間加樣品，上面鋪Buffer或液體石臘油。
    (4)加樣方法與加樣量：
    將樣品加到梯度液柱上，針尖和離心管成45-60°角度，慢慢地將樣品沿管壁流到液面上去，對(duì)于DNA一類(lèi)易斷的脆弱樣品，應(yīng)該用孔徑較大的移液管代替針頭，以避免剪切力對(duì)樣品的切割作用。樣品濃度是梯度柱小密度的1/10(W/W)。
    (5)轉(zhuǎn)子的選擇與效應(yīng)：
    (6)分離區(qū)帶的回收及檢測(cè)
    離心后所形成的區(qū)帶樣品的回收方法基本有四種：
    a.穿刺法
    穿刺離心管底部，使梯度溶液滴出，將一具有合適閥門(mén)的蓋帽放在離心管頂，可控制滴出速度。
    b.虹吸法：
    將一毛細(xì)管輕輕插入管底，盡量防止梯度抖動(dòng)，用微量泵逐漸滴取，以一定量滴數(shù)或體積部分收取。
    c.加壓法：
    通過(guò)一針管將高密度的液體泵入到梯度離心管的底部，部分收集換出的溶液。
    d.切割法：
    采用的切割刀切割所需區(qū)帶。
    區(qū)帶檢測(cè)：
    所謂區(qū)帶檢測(cè)，實(shí)際上是對(duì)水平轉(zhuǎn)子或角轉(zhuǎn)子和垂直轉(zhuǎn)子離心管中的分離物質(zhì)所做的監(jiān)測(cè)，通常只是測(cè)量在260或280mm時(shí)長(zhǎng)的吸收值，以決定梯度中的核酸或蛋白的整個(gè)分布，這個(gè)操作通常稱(chēng)之為在線(online)監(jiān)測(cè)。