人免疫球蛋白A2(IgA2)ELISA試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中人(IgA2)的含量。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
[實驗原理]
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被人(IgA2)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人(IgA2)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
[說明]
1.zui終的實驗結(jié)果與試劑的有效性、實驗者的相關(guān)操作以及當時的實驗環(huán)境密切相關(guān),請務(wù)必準備充足的標本備份。
2.不同批次的同一產(chǎn)品可能會有少許差別,如:檢測限、靈敏度以及顯色時間等,請依據(jù)試劑盒內(nèi)說明書進行實驗操作,網(wǎng)站電子版說明書僅作參考。
3.只有全部使用本試劑盒配套試劑才能保證檢測效果,不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴格遵守本試劑盒的實驗說明才會得到*的檢測結(jié)果。
4.本公司只對試劑盒本身負責,不對因使用該試劑盒所造成的樣本消耗負責,請使用者使用前充分考慮到樣本的可能使用量,預(yù)留充足的樣本。
5.使用化學裂解液制備的組織勻漿或細胞提取液可能會由于某些化學物質(zhì)的引入導致ELISA實驗結(jié)果偏差。
6.若樣本為細胞培養(yǎng)上清,因該類樣本干擾因素較多,如:細胞狀態(tài)、細胞數(shù)量、采樣時間等,所以可能存在檢測不出的情況。
7.某些天然蛋白或重組蛋白,包括原核及真核重組蛋白,可能因為與本產(chǎn)品所使用的檢測抗體及捕獲抗體不匹配,而不被檢測出。
在實際操作中,除了挑選優(yōu)良試劑外,有必要嚴厲依照操作過程進行操作,一起作好室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評,以謹慎的工作作風檢查每一份標本,才干確保檢查質(zhì)量。ELISA試劑盒如今國內(nèi)已有適當數(shù)量的單位具有全自動酶標儀,這關(guān)于完成ELISA規(guī)范化檢查、進步檢查質(zhì)量起到了重要作用。
人免疫球蛋白A2(IgA2)ELISA試劑盒實驗中遇到的問題解答
一、洗板
也許因素:
1) 選用手藝洗板,孔與孔之間液體穿插。 2) 選用半自動洗板機洗板時,洗液量不足,致使洗板不*;洗板針阻塞,抽吸不*;洗板不暢,致使洗板作用差。 3) 反響板過多形成洗板等待時刻長。
解決辦法:
1) 確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(挑選潔凈、無或少塵的吸水資料)上輕輕拍干; 2) 合理安排,或多用幾臺洗板機。
二、顯色
ELISA試劑盒也許因素:
1) 顯色劑制造后放置時刻過長或運用過期顯色劑; 2) 加顯色劑時濺起孔外形成液體回流。
解決辦法: 1) 顯色劑盡量在臨用前制造,堅持不bi過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不必; 2) 加樣時堅持顯色劑不外流; 3) A、B液應(yīng)防止觸摸金屬器械。
三、停止
也許因素如加停止液時發(fā)生較多氣泡,致使假陽性添加。所以在加停止液時應(yīng)防止發(fā)生氣泡。
四、讀板
ELISA試劑盒如讀板時板底不清洗等。應(yīng)確保酶標板清洗。所以在全部操作過程中確保酶標板不觸摸次氯酸; 盡也許完成ELISA檢查規(guī)范自動化,有用進步檢查質(zhì)量。
[注意事項]
1.嚴格按照規(guī)定的時間和溫度進行溫育以保證準確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。
2.洗板不正確可以導致不準確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過程中不要讓微孔干燥掉。
3.消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。
4.底物顯色液應(yīng)呈無色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍的底物液不能使用。
5.避免試劑和標本的交叉污染以免造成錯誤結(jié)果。
6.在儲存和溫育時避免強光直接照射。
7.平衡至室溫后再打開密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。
8.任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強烈氣體。任何漂白成分都會破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。
9.不能使用過期產(chǎn)品。
10.如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。