實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：
一、肝素的配制：
市售肝素凍干粉140單位/mg，1克瓶裝，每瓶140，000單位，稱取0.1克肝素凍干粉，加生理鹽水5ml，配成2800單位/ml。取50～100μl濕潤(rùn)管壁，可抗凝人血3～5ml，血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固，所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉，加3ml生理鹽水溶解后，取50～100μl,可抗凝鼠血2～4ml。
肝素抗凝管的制備：取0.1克肝素凍干粉，加2.5ml生理鹽水。取100μl～150μl滴入塑料或玻璃管中，濕潤(rùn)管壁，低于80℃小烤箱中（可以用烤面包的小烤箱），橫向轉(zhuǎn)動(dòng)，每隔5～10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次，直至干燥后放入4℃保存，可使2～5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集：
全血根據(jù)收集的條件，分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí)，不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清；抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1～2小時(shí)，直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血，輕輕顛倒充分抗凝后，可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征，選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn)：
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
特別提醒：本產(chǎn)品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱：甲醛脫氫酶（FDH）測(cè)試盒紫外分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格：50管/48樣
檢測(cè)方法：紫外分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào)：BK-01S6346
產(chǎn)品分類：輔酶Ⅰ系列
商品介紹：
測(cè)定意義: 甲醛是一種能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的活潑化合物，對(duì)所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶（ADH）的家庭成員之一，廣泛存在于原核和真核生物中，該酶能利用NAD+作為輔酶，將有毒的甲醛氧化，是甲醛氧化途徑中的關(guān)鍵酶。 測(cè)定原理 甲醛脫氫酶催化甲醛和NAD+產(chǎn)生NADH，在340nm處的吸光值會(huì)增加，測(cè)定340nm處的吸光值變化，可計(jì)算得到甲醛脫氫酶的活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、離心機(jī)、分光光度計(jì)、1mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿（光徑 1cm）、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶（SOD）的測(cè)定：
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)！
1、樣本制備
① 組織樣本： 取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.25g），加入 1mL 提取液，在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)液。 【注】：若增加樣本量，可按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本： 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液，超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）； 12000rpm 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測(cè)。 【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（10 4）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本：直接檢測(cè)；若渾濁，離心后取上清檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng)：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2，建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用（10μl試劑二原液+60μl蒸餾水）。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管，對(duì)照管數(shù)值在什么范圍？
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是（1）試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用；（2)沒(méi)有按順序加試劑；（3）反應(yīng)時(shí)間不夠，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min）。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管，可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大，為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè)，通?？梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
500mL Blotto in TBS Blotto in TBS 常溫保存
1g 分子生物學(xué)級(jí)糖原干粉 Glycogen Powder 常溫
2 ug pGL4.30[Luc2P/NFAT-RE/Hygro] pGL4.30[Luc2P/NFAT-RE/Hygro] 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
煌綠瓊脂培養(yǎng)基 Brilliant Green Agar Medium 250g
1瓶 HCCLM3細(xì)胞株 HCCLM3 低溫運(yùn)輸和保存
10次 百萬(wàn)堿基級(jí)真菌DNAout
500U Tth 核酸內(nèi)切 IV Tth Endonuclease IV -20℃保存
250mL RIPA Buffer—2 RIPA Buffer—2 常溫保存
1 管 DH10B大腸桿菌 DH10B E.coli Strain -80℃保存
2 ug pREV pREV 低溫運(yùn)輸，-20℃保存
O157菌成套生化鑒定管 11種*1套/盒*10盒
甲醛脫氫酶（FDH）測(cè)試盒紫外分光光度法FMDV Polyprotein (3A protein) 口蹄疫毒A型抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-MAPK14(Tyr323) 磷酸化p38MAPK抗體 規(guī)格: 0.1ml
TET1/CXXC6 Ten-eleven轉(zhuǎn)運(yùn)基因1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlNRP1/CD304 神經(jīng)纖毛蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
MIP4/CCL18 巨噬細(xì)胞癥蛋白18抗體 規(guī)格: 0.1mlDNase gamma 脫氧核糖核酸γ抗體 規(guī)格: 0.2ml
MRF/C11orf9 髓鞘基因調(diào)控因子抗體 規(guī)格: 0.2mlMYBBP1A/p53 activated protein 2 p53激活蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-Mouse IgG/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-Avidin 兔抗親和素 規(guī)格: 1mg
PGF2 α 前列素F2a抗體 規(guī)格: 0.2mlalpha 2 Macroglobulin α2巨球蛋白(α-2M)抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-KLF5(Ser275) 磷酸化KLF5抗體 規(guī)格: 0.1mlMouse Anti-Bov IgG/PE PE標(biāo)記的小鼠抗牛IgG 規(guī)格: 0.1ml
SFR19 剪接因子，/絲豐富19 規(guī)格: 0.2mlPhospho-SATB1 (Ser47) 磷酸化核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
APOC2 載脂蛋白C2抗體 規(guī)格: 0.1mlAPEX2 嘌呤嘧啶核酸內(nèi)切2抗體 規(guī)格: 0.1ml
MAP3K2/MEKK2 絲裂原活化蛋白激激2抗體 規(guī)格: 0.1mlDonkey Anti-human IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/Cy3 Cy3標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1mlCDC3/CDC10/Septin 7 細(xì)胞周期調(diào)控因子3抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD1A T淋巴細(xì)胞CD1A抗體 規(guī)格: 0.1mlPhospho-HER3 (Tyr1197) 磷酸化HER3受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
