免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
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英文名稱 Anti-C9orf71
中文名稱 C9orf71抗體
別 名 C9orf71; Chromosome 9 open reading frame 71; TM252_HUMAN; MGC34760; RP11-274B18.1; TMEM252; Transmembrane protein 252; Transmembrane protein C9orf71.
濃 度 1mg/1ml
規(guī) 格 0.2ml/200μg
抗體來源 Rabbit
克隆類型 polyclonal
交叉反應 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse
產(chǎn)品類型 一抗
研究領域 細胞生物 免疫學
蛋白分子量 predicted molecular weight: 19kDa
性 狀 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C9orf71
亞 型 IgG
免疫熒光技術的實驗步驟:
一、準備好試劑與儀器:
磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。
二、實驗步驟
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,十分鐘后棄去,使標本保持一定濕度。
2.滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間以三十分鐘為參考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分鐘,并不停地搖晃振蕩。
4.取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度。
抗體的制備過程:
1. 免疫原的制備
普通的大分子蛋白,通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白,純化鑒定后可直接作為免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免疫原性的抗原,常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫動物
常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等,大量生產(chǎn)時需要用到狗、綿羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、綿羊、山羊可采用靜動脈采血,家兔、豚鼠、大鼠、雞可采用心臟采血,家兔、山羊、綿羊可采用靜脈采血。
4. 免疫血清的純化與鑒定得到的抗血清需要進一步的純化,利用偶聯(lián)了抗原的親和柱進行層析,具有高效,特異性強,純度高的特定。接著要鑒定純化蛋白的含量、相對分子的質量、純度以及特異性。
5. 免疫血清的保存建議將抗體分裝后進行保存。抗體一般比較穩(wěn)定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存約5年而不會影響效價,而真空干燥保存時間可以更久。保存前需經(jīng)除菌并添加防腐劑。
實驗步驟:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標本片上,10min后棄去,使標本保持一定濕度。
② 滴加適當稀釋的熒光標記的抗體溶液,使其*覆蓋標本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時間(參考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不時振蕩。
④ 取出玻片,用濾紙吸去多余水分,但不使標本干燥,加一滴緩沖甘油,以蓋玻片覆蓋。
⑤ 立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標本的特異性熒光強度,一般可用“+”表示:
(-)無熒光;(±)極弱的可疑熒光;(+)熒光較弱,但清楚可見;(++)熒光明亮;(+++ --++++)熒光閃亮。待檢標本特異性熒光染色強度達“++”以上,而各種對照顯示為(±)或(-),即可判定為陽性。
雞白介素2受體α(IL-2Rα/CD25)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒氘代苯-d8長雙歧桿菌長亞種拉丁屬名: Pholiota nameko
雞血清素轉運體(SERT)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒氘代苯-d8滑菇拉丁屬名: Bacillus subtilis
雞巨噬炎性蛋白5(MIP-5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-苯硫酚枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
雞趨化因子CXC配體16 (CXCL16)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-苯硫酚植物乳桿菌植物亞種拉丁屬名: coli
雞胃動素(MTL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-苯硫酚大腸埃希菌拉丁屬名: Pseudomonas putida
雞單核趨化蛋白1(MCP-1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2H-1,3-苯并噁-2,4(3H)-二假單胞菌拉丁屬名: Chitinophaga pinensis
雞鞘磷脂(SM/SPH)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 2H-1,3-苯并噁-2,4(3H)-二松樹噬幾丁質菌拉丁屬名: Enterococcus faecalis
雞XVII型膠原(COL17)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氨乙嗎啉糞腸球菌拉丁屬名: Beauveria bassiana
雞絲氨蛋白酶23(PRSS23)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒2-氨乙嗎啉球孢白僵菌拉丁屬名: Aspergillus carbonarius
雞維生素D受體(VDR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Fmoc-L-beta-高谷氨 6-叔丁酯炭黑曲霉拉丁屬名: septicum
雞黑色素瘤轉移表面黏附分子(MMSAM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒3-苯梭菌拉丁屬名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
雞剪切修復交叉互補因1(ERCC1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 3-苯釀酒酵母拉丁屬名: Penicillium urticae Bainier
雞衰老關鍵蛋白4(FBLN4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒N-Boc-4,4-二氟-L-脯氨酯蕁麻青霉拉丁屬名: suis
雞CCAAT增強子結合蛋白δ(C/EBPδ)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 N-Boc-反式-4-氟-L-脯氨酯豬鏈球菌用途: 用于抗蟲因的分離和抗蟲相關礎研究。
雞腺苷環(huán)化酶2(ADCY2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 N-Boc-反式-4-氟-L-脯氨酯蘇云金芽胞桿菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用
雞肌鈣蛋白C2 (TNNC2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒4-溴代苯乙烯葡萄座腔菌拉丁屬名: 非無菌藥品 耐膽鹽革蘭陰性菌(陰性)
C9orf71抗體雞色素P450氧化還原酶(CPR)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-CBL2 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗體IgG
雞周期素依賴性激酶抑制因子3(CDKN3)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-phospho-CBL2(Tyr731) /FITC 熒光素標記磷酸化原癌蛋白CBL2抗體IgG
雞CXC趨化因子受體1(CXCR1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-phospho-CBL2(Tyr774) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化原癌蛋白CBL2抗體IgG
雞軸突生長誘向因子1(Ntn1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-CBP/FITC 熒光素標記CREB結合蛋白抗體IgG
雞抗胰島素受體抗體(AIRA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-CBX3/FITC 熒光素標記染色盒同源物3抗體IgG
雞γ谷氨酰轉移酶1(γGT1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-CBX5/FITC 熒光素標記CBX5抗體IgG
雞半乳凝集素12(GAL12)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Cbx8/FITC 熒光素標記染色質結合蛋白Cbx8抗體IgG
雞BCL2修飾因子(BMF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-CC16/FITC 熒光素標記克拉拉蛋白(Clara分泌蛋白)抗體IgG