紫外檢測(cè)儀(高性能雙光束雙波長(zhǎng))/雙波長(zhǎng)紫外檢測(cè)儀
型號(hào):DP-1
波長(zhǎng)范圍: 254nm、280nm(同時(shí)檢測(cè))、 可在254nm、280nm-400nm譜線之間任選兩個(gè)波長(zhǎng)同時(shí)檢測(cè)。 內(nèi)置數(shù)據(jù)處理 ,雙顯示屏。 蛋白質(zhì)280nm/254nm雙波長(zhǎng)測(cè)定: 蛋白質(zhì)分子中含有共軛雙鍵的*、*等芳香族氨基酸。它們具有吸收紫外光的性質(zhì),其吸收高峰在280nm波長(zhǎng)處,且在此波長(zhǎng)內(nèi)吸收峰的光密度值與其濃度成正比關(guān)系,故可作為蛋白質(zhì)定性、定量測(cè)定的依據(jù),正因?yàn)槿绱耍?80nm處的紫外吸收法通常被用于層析系統(tǒng)中蛋白質(zhì)濃度的連續(xù)監(jiān)控。但由于各種蛋白質(zhì)的*和*的含量不同,故要準(zhǔn)確定量,必需要有待測(cè)蛋白質(zhì)的純品作為標(biāo)準(zhǔn)來比較,或且已經(jīng)知道其消光系數(shù)作為參考。另外,不少非蛋白物質(zhì)在280nm波長(zhǎng)下也有—定吸收能力,可能發(fā)生干擾。其中尤以核酸(嘌呤和嘧啶堿)的影響更為嚴(yán)重。在280nm處的吸收比蛋白質(zhì)強(qiáng)10倍(每克),但核酸在254nm處的吸收更強(qiáng),其吸收高峰在254nm附近。核酸254nm處的消光系數(shù)是280nm處的2倍,而蛋白質(zhì)則相反,280nm紫外吸收值大于254nm的吸收值。通常: 純蛋白質(zhì)的光吸收比值:A280/A254 && 1.8 純核酸的光吸收比值: A280/A254 << 0.5 因此蛋白質(zhì)溶液中同時(shí)存在核酸時(shí)(生物體系大多數(shù)如此),同時(shí)測(cè)定OD254nm,與OD280nm。然后根據(jù)兩種波長(zhǎng)的吸收度的比值,通過經(jīng)驗(yàn)公式校正,以消除核酸的影響而推算出蛋白質(zhì)的真實(shí)含量。 蛋白質(zhì)濃度=1.45×A280-0.74×A254 (mg/ml) 此經(jīng)驗(yàn)公式是通過一系列已知不同濃度比例的蛋白質(zhì)(酵母烯醇化酶)和核酸(酵母核酸)的混合液所測(cè)定的數(shù)據(jù)來建立的。 |
應(yīng)用范圍: 高性能雙光束紫外檢測(cè)儀,用于 蛋白質(zhì)、酶、核酸、核苷酸、多肽、(含/不含芳香族氨基酸)及其它任何有紫外吸收的生物/非生物樣品的分離分析、流動(dòng)檢測(cè)。 1.光 源: 紫外光譜燈,光源使用壽命達(dá)1萬小時(shí) (等同于國(guó)外AKT的光源),儀器可不關(guān)機(jī)連續(xù)工作; |