1、用途:分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和波長(zhǎng)重復(fù)性是分光光度計(jì)重要的技術(shù)指標(biāo),每年至少要進(jìn)行一次檢定測(cè)試。鐠銣玻璃是分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度和重復(fù)性檢定常用的檢具之一,每一片鐠銣玻璃都附有標(biāo)準(zhǔn)的波長(zhǎng)值,通過(guò)實(shí)際測(cè)量分光光度計(jì)波長(zhǎng)值,并拿測(cè)量值減去標(biāo)準(zhǔn)值,得出該臺(tái)分光光度計(jì)波長(zhǎng)準(zhǔn)度值,從而判斷該臺(tái)儀器是否合格。
2、實(shí)驗(yàn)程序:在分光光度計(jì)整個(gè)波長(zhǎng)范圍內(nèi)按每大約100 nm左右選擇一個(gè)波長(zhǎng)點(diǎn)選用透射比方式,以空氣作參比測(cè)量氧化鈥玻璃的吸收峰波長(zhǎng)。單方向?qū)γ恳唤M譜線(或吸收峰)按波長(zhǎng)順序依次測(cè)量,測(cè)量三次,每個(gè)波長(zhǎng)三次測(cè)量值的平均值與參考波長(zhǎng)標(biāo)稱值之差為單波長(zhǎng)誤差,單波長(zhǎng)誤差中的大值為波長(zhǎng)準(zhǔn)確
度;每個(gè)波長(zhǎng)三次測(cè)量值的大值與小值之差為單波長(zhǎng)重復(fù)性,所有單波長(zhǎng)重復(fù)性之中的大值為儀器的波長(zhǎng)重復(fù)性。
3、實(shí)驗(yàn)方法:
3.1非自動(dòng)掃描型分光光度計(jì)
1)選取儀器透射比測(cè)量模式,
2)波長(zhǎng)調(diào)整到標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)前3個(gè)nm處,
3)用空氣作空白調(diào)整儀器透射比為99%
4)把鐠銣玻璃濾光片放入樣品架內(nèi)第二個(gè)槽里面,(*個(gè)槽為參比槽);
5)然后將鐠銣玻璃濾光片拉入光路中,并記錄此時(shí)透射比的讀數(shù);
6)往高波長(zhǎng)處調(diào)整0.1-0.5nm波長(zhǎng)值(波長(zhǎng)準(zhǔn)確度在±2nm的調(diào)整0.5nm; 波長(zhǎng)準(zhǔn)確度在±1nm的調(diào)整0.2nm;波長(zhǎng)準(zhǔn)確度在±0.5nm的調(diào)整0.1nm).
7)重復(fù)步驟3)-5)直致測(cè)量出相對(duì)小透過(guò)率,即為該波長(zhǎng)處的實(shí)測(cè)波長(zhǎng)值。
8)重復(fù)測(cè)量三次大波長(zhǎng)值-小波長(zhǎng)值即為波長(zhǎng)重復(fù)性。
3.2 自動(dòng)掃描型分光光度計(jì)
1)測(cè)試波長(zhǎng)范圍設(shè)置為230-650nm,掃描間距(采樣間距)為0.1nm,掃描速度為低俗,測(cè)量模式為透過(guò)率;
2)對(duì)空氣校準(zhǔn)儀器空白;
3)把放入樣品架內(nèi)第二個(gè)槽里面,(*個(gè)槽為參比槽)
4)掃描
5)檢索并記錄透光率小峰值
6)重復(fù)測(cè)量三次大波長(zhǎng)值-小波長(zhǎng)值即為波長(zhǎng)重復(fù)性。