Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 647 流式細(xì)胞分析檢測(cè)試劑盒用于分析增殖細(xì)胞中的 DNA 復(fù)制，是一種較傳統(tǒng) BrdU 法更簡(jiǎn)單、更可靠的檢測(cè)方法。采用流式細(xì)胞儀的 647 nm 激光分析新合成的 DNA。Click-iT® Plus 配方與標(biāo)準(zhǔn)熒光基團(tuán)（包括 R-PE、R-PE 串聯(lián)體以及熒光蛋白）兼容。

?可聯(lián)用—可與 R-PE（和串聯(lián)體）及熒光蛋白兼容
?準(zhǔn)確—檢測(cè)結(jié)果優(yōu)于 BrdU 檢測(cè)
?快速—可在短短 60 分鐘內(nèi)獲得結(jié)果

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可聯(lián)用
與初代 Click-iT® EdU 流式細(xì)胞分析檢測(cè)相比，Click-iT Plus® 配方具有更好的聯(lián)用性。Click-iT® Plus EdU 檢測(cè)可與 R-PE 和 R-PE 串聯(lián)體，以及各種熒光蛋白（如 GFP 和 mCherry）配合使用，同時(shí)還具有初代 Click-iT® EdU 檢測(cè)準(zhǔn)確、快速的特點(diǎn)。

更出色的 BrdU 替代方法，提供更優(yōu)結(jié)果
更準(zhǔn)確的增殖分析方法，可直接測(cè)量 DNA 合成。最初，這是通過(guò)摻入放射性核甘酸來(lái)完成的。隨后基于抗體的溴脫氧尿苷（BrdU，核苷類(lèi)似物）法取代了這種檢測(cè)方法。Click-iT® Plus EdU 流式細(xì)胞分析檢測(cè)是替代 BrdU 檢測(cè)的新方法。EdU（5-乙炔基-2′-脫氧尿苷）是胸苷類(lèi)似物，可在活躍的 DNA 合成過(guò)程中摻入 DNA 中。檢測(cè)基于點(diǎn)擊化學(xué)，在銅催化反應(yīng)中，炔與染料標(biāo)記的疊氮化物反應(yīng)，形成穩(wěn)定的共價(jià)鍵。在該應(yīng)用中，在 EdU 的乙炔基團(tuán)中發(fā)現(xiàn)了炔烴，而疊氮化物偶聯(lián)至 Alexa Fluor® 染料。標(biāo)準(zhǔn)流式細(xì)胞分析方法用于檢測(cè)細(xì)胞群中 S 期細(xì)胞的百分比。

溫和條件，可與細(xì)胞周期染料和抗體配合使用
小型疊氮染料，可使用溫和條件高效檢測(cè)摻入的 EdU，同時(shí)具有足夠的基于醛的標(biāo)準(zhǔn)固定和去污劑透化能力，可用于 Click-iT® Plus 檢測(cè)試劑，以獲得 DNA。這與 BrdU 檢測(cè)相反，BrdU 檢測(cè)需要使用 HCl、加熱或用 Dnase 消化變性 DNA，使 BrdU 暴露以便用抗 BrdU 抗體檢測(cè)。BrdU 法處理樣品會(huì)改變細(xì)胞周期分布，且 HCl 可破壞抗原識(shí)別位點(diǎn)。相比之下，易于使用的 Click-iT® Plus EdU 檢測(cè)與細(xì)胞周期染料兼容。Click-iT® Plus EdU 檢測(cè)也可與細(xì)胞表面和細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記物的抗體以及標(biāo)記標(biāo)準(zhǔn)熒光基團(tuán)的偶聯(lián)物（包括 R-PE、R-PE 串聯(lián)體和熒光蛋白（GFP 和 mCherry）聯(lián)用。

快速簡(jiǎn)便的方案
Click-iT® Plus EdU 方案基于免疫組化抗體標(biāo)記的醛基固定和洗滌劑透化步驟。但是，EdU 與其他固定劑/透化劑（包括皂苷和甲醇）兼容。只需五步就能分析細(xì)胞增殖數(shù)據(jù)：

1.’用 EdU 處理細(xì)胞。
2.固定并透化細(xì)胞。
3.使用 Click-iT® Plus 檢測(cè)混合物檢測(cè) S 期細(xì)胞 30 min。
4.清洗一次。
5.分析。

在某些情況下，60 分鐘內(nèi)即可獲得結(jié)果，但我們建議所有應(yīng)用采用 90 分鐘。