PCR實(shí)驗(yàn)室
基因擴(kuò)展實(shí)驗(yàn)室又稱PCR實(shí)驗(yàn)室,其特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅度增加,PCR是分子生物學(xué)研究和實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)方法
1. PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局圖
實(shí)驗(yàn)室原則上分為四個(gè)單獨(dú)的區(qū)域,前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū),后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)。擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后去應(yīng)該嚴(yán)格分開。實(shí)驗(yàn)材料、試劑、記錄紙、筆、清潔材料等,只能從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū),為避免交叉污染,進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域必須嚴(yán)格遵循單一方向進(jìn)行,即只能從試劑準(zhǔn)備區(qū)→標(biāo)本制備區(qū)→擴(kuò)擴(kuò)增區(qū)→擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)。各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行。
2. 各區(qū)功能及主要設(shè)備
1. 試劑準(zhǔn)備區(qū):擴(kuò)增試劑的配置、分裝和保存。未設(shè)立緩沖間的試劑儲(chǔ)存和準(zhǔn)備區(qū),工作區(qū)域?yàn)檎龎?。用于擴(kuò)增的試劑應(yīng)冰凍儲(chǔ)存。主要設(shè)備有天平、冰箱、離心機(jī)、加樣器、振蕩器、紫外燈。
2. 樣品制備區(qū):實(shí)驗(yàn)室樣品的混樣和測(cè)試樣品的制備。未設(shè)立緩沖間時(shí)工作區(qū)域?yàn)樨?fù)壓或減壓,可安裝排風(fēng)系統(tǒng)。所用的器具在使用前應(yīng)經(jīng)過清洗并消毒,防止交叉污染。主要設(shè)備有冰箱,生物安全柜(潔凈工作臺(tái),通風(fēng)柜)離心機(jī),加樣器,振蕩器,恒溫水浴,上下水設(shè)備,廢棄物容器,紫外燈。
3. 擴(kuò)增區(qū):PCR擴(kuò)增反應(yīng)體系的配置和模版的加入,核酸擴(kuò)增。未設(shè)立緩沖間的擴(kuò)增區(qū),工作區(qū)域?yàn)樨?fù)壓或減壓,可安裝排風(fēng)系統(tǒng)。加樣應(yīng)在超凈工作臺(tái)(生物安全柜)內(nèi)進(jìn)行。超凈工作臺(tái)的氣流選擇垂直流。
4. 擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定,未設(shè)立緩沖間的擴(kuò)增產(chǎn)物區(qū),工作區(qū)域?yàn)樨?fù)壓或減壓,應(yīng)安裝排風(fēng)系統(tǒng)。