全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀核心設(shè)計(jì)理念與主要特點(diǎn),具體如下:
- 采用*的圖像分析方法(區(qū)別于傳統(tǒng)的庫(kù)爾特計(jì)數(shù)原理,如Millipore的Scepter),計(jì)數(shù)結(jié)果準(zhǔn)確、穩(wěn)定;
- 多維自動(dòng)聚焦技術(shù);
- 哺乳動(dòng)物細(xì)胞總數(shù)及活細(xì)胞計(jì)數(shù);
- 一步操作,30秒內(nèi)實(shí)現(xiàn)真正的全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)。
全自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀技術(shù)參數(shù):
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計(jì)數(shù)時(shí)間 | 30秒 |
細(xì)胞濃度范圍 | 5x104–1x107cells/ml |
樣品體積 | 10 μl |
細(xì)胞直徑范圍 | 6~50微米 |
數(shù)據(jù)儲(chǔ)存 | 100個(gè)數(shù)據(jù) |
數(shù)據(jù)輸出 | USB flash drive (USB port A) |
打印機(jī)兼容性 | USB port A or B |
內(nèi)置稀釋度計(jì)算器 | 有 |
細(xì)胞圖像查看功能 | 有 |
體積 (w/d/h) | 19 x 16 x 25.4m (7.5 x 6 x 10") |
重量 | 2.2 kg (不含外接電源) |
另外,之前用于TC10的耗材與外圍設(shè)備與TC20兼容,產(chǎn)品名稱與貨號(hào)也與原來(lái)保持*:Counting kit (包含slides與trypan blue),Counting slides,Trypan blue dye, Thermal label printer & labels和Verification kit。
雖然TC20在外觀上與TC10幾乎一模一樣,但由于采用了全新的鏡頭以及更加強(qiáng)大的分析算法,相比TC10在性能上有了如下主要的提升:
- TC20活細(xì)胞計(jì)數(shù)直徑范圍:6~50微米,而TC10活細(xì)胞計(jì)數(shù)直徑范圍:10~50微米??蓪?duì)干細(xì)胞、從血液、組織等獲得的各種原代細(xì)胞如淋巴細(xì)胞、外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)等進(jìn)行準(zhǔn)確地計(jì)數(shù),這是TC10無(wú)法實(shí)現(xiàn)的
- 細(xì)胞直徑分選功能:在處理諸如原代細(xì)胞等復(fù)雜樣品時(shí),可通過(guò)設(shè)定細(xì)胞直徑范圍對(duì)目標(biāo)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)
- PC應(yīng)用軟件——TC20 Data Analyzer,用戶可將原始計(jì)數(shù)數(shù)據(jù)從TC20上導(dǎo)出,并在PC機(jī)上利用TC20 Data Analyzer軟件進(jìn)行后續(xù)分析。該軟件可從Bio-Rad網(wǎng)站上免費(fèi)下載
- 用戶可對(duì)每個(gè)樣品獨(dú)立命名,進(jìn)行大量樣品計(jì)數(shù)時(shí),也可采用自動(dòng)命名工具節(jié)省時(shí)間
- 可自動(dòng)將原始數(shù)據(jù)導(dǎo)出到U盤,其中包含柱狀圖、樣品名稱等信息
TC20新功能 | |
活細(xì)胞/總細(xì)胞直徑范圍 | 6~50微米 |
細(xì)胞直徑分選功能 | 有 |
PC可選分析軟件 | 有,TC20 Data Analyzer |
數(shù)據(jù)自動(dòng)導(dǎo)入U(xiǎn)SB | 有 |
樣品命名 | 有 |
TC20有2種計(jì)數(shù)模式:一種是和TC10一樣的全自動(dòng)模式;另一種就是直徑分選功能,該功能可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行有選擇性的計(jì)數(shù)??筛鶕?jù)用戶輸入的細(xì)胞直徑范圍對(duì)該大小范圍內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。該模式特別適用于對(duì)含有多種細(xì)胞類型的復(fù)雜樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)、分析,如干細(xì)胞、原代細(xì)胞等。
如要使用細(xì)胞直徑分選功能,必須激活User defined gates選項(xiàng)。激活該選項(xiàng)后,會(huì)在計(jì)數(shù)前顯示柱狀圖,隨后輸入細(xì)胞直徑的范圍。TC20只會(huì)對(duì)設(shè)定范圍大小內(nèi)的細(xì)胞進(jìn)行分析,大小范圍超出設(shè)定范圍的細(xì)胞則不被分析。如上圖示。
TC20可保存之前設(shè)定的細(xì)胞直徑范圍,用于后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
用戶還可激活圖像預(yù)覽功能,在設(shè)定直徑范圍內(nèi)的細(xì)胞在預(yù)覽圖上顯示為黃色。當(dāng)調(diào)整直徑范圍大小時(shí),預(yù)覽圖會(huì)隨設(shè)置的不同進(jìn)行更新。
如果對(duì)一種全新的細(xì)胞種類進(jìn)行計(jì)數(shù),可將直徑范圍設(shè)置在大值,在PC上利用TC20 Data Analyzer進(jìn)行后續(xù)分析,確定該細(xì)胞種類*的計(jì)數(shù)直徑范圍。如下圖。
如果沒(méi)有激活細(xì)胞直徑分選功能,那么TC20采用默認(rèn)的方式對(duì)所有細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)。得到的計(jì)數(shù)結(jié)果有可能反映了樣品中數(shù)量多的那種細(xì)胞,而非用戶真正想研究的細(xì)胞類型。
根據(jù)細(xì)胞計(jì)數(shù)在整個(gè)技術(shù)路線中的應(yīng)用,大致包括如下方向:
- 誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞(iPS or iPSC)與人胚胎干細(xì)胞(hESC)的相關(guān)研究
- 外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)計(jì)數(shù),因?yàn)镻BMC往往小于10微米
- 原代細(xì)胞計(jì)數(shù)。原代細(xì)胞往往來(lái)源于組織,種類多樣,如脂肪細(xì)胞、肝細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞和心肌細(xì)胞等
- 細(xì)胞培養(yǎng)中確定培養(yǎng)細(xì)胞的濃度
- 在流式細(xì)胞前確定細(xì)胞濃度,若濃度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致流式細(xì)胞儀的堵塞
- 毒理學(xué)研究——對(duì)細(xì)胞進(jìn)行一定條件的理化刺激前后進(jìn)行總細(xì)胞/活細(xì)胞的計(jì)數(shù),評(píng)估刺激條件的效果
- 病毒學(xué)研究——通過(guò)對(duì)感染細(xì)胞的計(jì)數(shù)分析評(píng)估病毒的感染強(qiáng)度