REH人急性非B非T淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基
產(chǎn)品簡介：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
REH人急性非B非T淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 125ML、500ML | BJ-X305 |
Reh細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持Reh細(xì)胞的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含Reh細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于Reh細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用，不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。
產(chǎn)品形態(tài) | 液體 |
產(chǎn)品濃度 | 1× |
產(chǎn)品規(guī)格 | 125mL×4 |
培養(yǎng)基成分 | RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S |
細(xì)菌檢測 | 陰性 |
真菌檢測 | 陰性 |
支原體檢測 | 陰性 |
細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn) | 細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常 |
內(nèi)毒素含量(EU/mL) | ≤3 |
儲存條件 | 2℃-8℃，避光儲存 |
運(yùn)輸條件 | 冰袋冷藏運(yùn)輸 |
有效期 | 3個月 |
細(xì)胞培養(yǎng)具體步驟：
一、常用設(shè)備
1. 準(zhǔn)備室的設(shè)備
單蒸餾水蒸餾器、雙蒸餾水蒸餾器、酸缸、烤箱、高壓鍋、儲品柜（放置未消毒物品）、儲品柜（放置消毒過的物品）、包裝臺。配液室的設(shè)備：扭力天平和電子天平（稱量藥品）、PH計（測量培養(yǎng)用液PH值）、磁力攪拌器（配置溶液室攪拌溶液）。
2. 培養(yǎng)室的設(shè)備
液氮罐、儲品柜（存放雜物）、日光燈和紫外燈、空氣凈化器系統(tǒng)、低溫冰箱（-80℃）、空調(diào)、二氧化碳缸瓶、邊臺（書寫實(shí)驗(yàn)記錄）。
3. 必須放在無菌間的設(shè)備
離心機(jī)（收集細(xì)胞）、超凈工作臺、倒置顯微鏡、CO2孵箱（孵育培養(yǎng)物）、水浴鍋、三氧消毒殺菌機(jī)、4℃冰箱（放置serum和培養(yǎng)用液）。
二、無菌操作
（一）無菌室的滅菌
1.定期打掃無菌室：每周打掃一次，先用自來水拖地、擦桌子、超凈工作臺等，然后用3‰來蘇爾或新潔爾滅或0.5％過氧乙酸擦拭。
2.CO2孵箱（培養(yǎng)箱）滅菌：先用3‰新潔爾滅擦拭，然后用75％酒精擦拭或者0.5％過氧乙酸，再用紫外燈照射。
3.實(shí)驗(yàn)前滅菌：打開紫外燈、三氧殺菌機(jī)、空氣凈化器系統(tǒng)各20-30分鐘。
4.實(shí)驗(yàn)后滅菌：用75％酒精（3‰新潔爾滅）擦拭超凈臺、邊臺、倒置顯微鏡的載物臺。
細(xì)胞培養(yǎng)方法：
01 原代培養(yǎng)操作步驟
原代培養(yǎng)的操作步驟為：取材→分離→培養(yǎng)。
（1）取材：對于不同的組織有不同的取材方法，但均應(yīng)保持材料的新鮮及嚴(yán)格無菌。
細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟如下：
（1）傳代前在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和生長密度，當(dāng)細(xì)胞生長密度達(dá)到80%~90%時，即可進(jìn)行傳代。
（2）吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)液。加入PBS清洗1~2次，左右輕輕搖晃后棄掉。
（3）根據(jù)培養(yǎng)瓶大小向瓶內(nèi)加入適量含EDTA的，一般應(yīng)覆蓋整個培養(yǎng)瓶底。
（4）把培養(yǎng)瓶放入37℃ CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，2~5min后拿出放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)有70%~80%細(xì)胞收縮變圓、細(xì)胞間隙變大時，再輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞脫落，然后立即加入2倍量的培養(yǎng)液中止消化，使用吸頭輕輕吹打，混合均勻，以防消化過度。
（5）吸出所有細(xì)胞懸液至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）棄上清，加入適量培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，輕輕吹打混勻，使細(xì)胞均勻分散。
（7）用吸頭吸取適量細(xì)胞懸液，以適宜的密度接種于新的培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)足培養(yǎng)液，搖勻，放置于37℃ CO2培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間，甚至進(jìn)行細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；1C7 | 大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)檢測試劑盒elisa |
抗補(bǔ)體C3小鼠7 | 降脂(Adipsin)ELISA試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；FQ-E7 | 大鼠骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)試劑盒ELISA |
抗補(bǔ)體備解小鼠7 | 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA檢測試劑盒 |
抗人白蛋白7 | IgA-Fc斷片受體(FcaR)ELISA試劑盒 |
小鼠雜交瘤細(xì)胞；ZMA1 | 豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVAsIgG)試劑盒ELISA |
1B12株 | 大鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)檢測試劑盒elisa |
人類T細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞 | 大鼠活化A(ACV-A)ELISA試劑盒 |
人胰腺癌細(xì)胞；PANC-1 | 人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)試劑盒ELISA |
AVND-3C8 | 大鼠血管緊張轉(zhuǎn)化(ACE)ELISA檢測試劑盒 |
抗人BCS1-like小鼠7 | 大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa試劑盒 |
外周血淋巴細(xì)胞 | REH人急性非B非T淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基大鼠巨噬細(xì)胞炎癥蛋白1β(MIP-1β/CCL4)試劑盒elisa |
小鼠雜交瘤細(xì)胞株；HBNV26 | 大鼠白介21(IL-21)檢測試劑盒elisa |
抗赭曲霉毒A7 | Exophilin5蛋白(EXPH5)ELISA試劑盒 |
抗人絨毛膜促性α7 | 豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)試劑盒elisa |
注意事項(xiàng)：
（1）嚴(yán)格進(jìn)行無菌操作，所用一切試劑及耗材均應(yīng)無菌，且須在無菌超凈工作臺中紫外照射30min以上，以免細(xì)胞發(fā)生污染。
（2）所用培養(yǎng)液必須適宜細(xì)胞生存和生長。來源于不同動物種類、組織類型的細(xì)胞，對培養(yǎng)液的要求不一樣，必要時可用預(yù)實(shí)驗(yàn)的方法選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)液。
（3）胎牛血清對于維持細(xì)胞生存，促進(jìn)細(xì)胞生長起著關(guān)鍵作用?？筛鶕?jù)文獻(xiàn)或預(yù)實(shí)驗(yàn)選擇合適的胎牛血清。一旦確定，就應(yīng)保持用至實(shí)驗(yàn)完成。
（4）消化細(xì)胞時應(yīng)避免消化時間過短導(dǎo)致消化不，收集到的細(xì)胞數(shù)量少，或消化時間過長導(dǎo)致細(xì)胞成團(tuán)塊樣絮狀游離，這時的細(xì)胞已有損傷或死亡，影響細(xì)胞數(shù)量和實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。
（5）細(xì)胞離心的時候應(yīng)避免離心力過小收集的細(xì)胞數(shù)量不夠，或離心力過大對細(xì)胞產(chǎn)生損傷。離心后的細(xì)胞沉淀?xiàng)壢ド锨搴?，?yīng)先彈散細(xì)胞沉淀，再加入培養(yǎng)液重懸，這樣比直接吹打?qū)?xì)胞損傷小，可以提高細(xì)胞活率。
（6）吹打細(xì)胞時應(yīng)盡量避免細(xì)胞的產(chǎn)生，以免損傷細(xì)胞，影響細(xì)胞狀態(tài)（吹打過程中殘留部分液體在吸頭內(nèi)可以減少氣泡的產(chǎn)生）。
