荷蘭Lumicks C-Trap
超分辨單分子動(dòng)力分析儀(熒光光鑷)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介
超分辨單分子動(dòng)力分析儀(熒光光鑷)--C-Trap,是世界上將光鑷、共聚焦或STED 超分辨顯微鏡和微流控系統(tǒng)結(jié)合的單分子操控儀器。C-Trap通過高度聚焦激光束產(chǎn)生的力來操作納米/微米顆粒,實(shí)現(xiàn)了對(duì)生物分子的單分子操縱,并且結(jié)合力學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)和共聚焦或 STED 超分辨顯微鏡,可以定位反應(yīng)的結(jié)合位點(diǎn),并實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)生物分子的單分子動(dòng)力學(xué)特性。C-Trap可以揭示大量分子相互作用的機(jī)制,包括:DNA的修復(fù)、DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄、核糖體的翻譯、生物分子馬達(dá)和酶、細(xì)胞膜的相互作用、DNA-DNA的相互作用、DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué)、DNA/RNA的結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué)蛋白質(zhì)的折疊(去折疊)、DNA的組織化和染色質(zhì)化、細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)機(jī)制等信息。
Lumicks 超分辨單分子動(dòng)力分析儀技術(shù)特征
√ 多重連續(xù)激光光阱捕獲 | √ 超穩(wěn)定負(fù)壓驅(qū)動(dòng)微流體
| √ 多重共聚焦掃描熒光顯微鏡 √ 單光子靈敏度 √ 可升級(jí)到STED超分辨率
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技術(shù)原理
Lumicks超分辨單分子動(dòng)力分析儀主要由微液流控制系統(tǒng)、光鑷操縱系統(tǒng)、力學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)以及共聚焦(超分辨率顯微鏡)成像系統(tǒng)組成。微液流控制系統(tǒng)采用分通道集成設(shè)計(jì),避免反應(yīng)體系交叉污染,確保多步驟生物反應(yīng)原位進(jìn)行;光鑷系統(tǒng)通過高度聚焦激光束產(chǎn)生的力來操作納米或微米級(jí)的介電質(zhì)顆粒,實(shí)現(xiàn)了對(duì)生物分子的單分子水平的操縱;結(jié)合力學(xué)檢測(cè)系統(tǒng)和共聚焦(超分辨率顯微鏡)成像系統(tǒng),同時(shí)從力學(xué)和光學(xué)角度,高精度定位反應(yīng)的結(jié)合位點(diǎn),實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)生物分子的單分子動(dòng)力學(xué)特性。
應(yīng)用領(lǐng)域
應(yīng)用包括:利用 CTFM(Correlative Tweezers – Fluorescence Microscopy)揭示大量分子相互作用機(jī)制的詳細(xì)信息,主要包括:
DNA的修復(fù) | 中間纖維 | 核糖體的翻譯 | 細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)機(jī)制 |
DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄 | 生物分子馬達(dá)和酶 | 細(xì)胞膜的相互作用 | DNA-DNA的相互作用 |
DNA發(fā)夾結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué) | DNA/RNA的結(jié)構(gòu)動(dòng)力學(xué) | 蛋白質(zhì)的折疊(去折疊) | DNA的組織化和染色質(zhì)化 |
DNA-蛋白互作可視化 | 蛋白折疊/去折疊 |
小分子、酶活性的研究 | 細(xì)胞骨架、分子馬達(dá)動(dòng)力學(xué)的研究 |
C-Trap規(guī)格參數(shù)
■ 光鑷: | ■ 共聚焦顯微鏡: | |
檢測(cè)范圍:50μ m×50μ m×35μ m(x,y,z) 獨(dú)立光阱數(shù)目:1-4 光阱類型:持續(xù)的激光提供穩(wěn)定精確的高強(qiáng)度捕獲 力學(xué)檢測(cè)分辨率: <0.1pN @100Hz, 2μ m 聚苯乙烯微球(由生物樣品決定) zui大逃逸力:1000pN , 4.5μm 聚苯乙烯微球 應(yīng)力穩(wěn)定性:<1pN 光阱轉(zhuǎn)角頻率:0.1kHz-15kHz光阱距離分辨率:<0.3nm @100Hz 小步移: <0.5nm 光阱移動(dòng)特性:所有光阱可在 x,y 平面獨(dú)立移動(dòng);1+2,3+4 可在三維空間成對(duì)移動(dòng) 運(yùn)動(dòng)微球追蹤精確度:<3nm @ 100Hz 視頻分析
| 可視范圍:50μm×35μm(x,y) 共聚焦顏色*:多可三色共用,從 488nm 到 647nm 之間的十種波長(zhǎng)中選擇 共聚焦分辨率: 衍射極限之內(nèi) STED 分辨率*:<35nm 掃描速度:線性掃描速度 200Hz 定位精度:<15nm 光斑定位精確度:<1nm 背景抑制極限:100nM @1ms 積分時(shí)間 敏感度:極低的亮度檢測(cè)極限以及單光子計(jì)數(shù)。可檢測(cè)單個(gè) eGFP 其他值得注意的特點(diǎn):和光鑷*的結(jié)合,交互式體驗(yàn) | |
■ u-Flux 微流控: | ■ 軟件: | |
微流控流動(dòng)系統(tǒng):負(fù)壓系統(tǒng)可以在層流環(huán)境下檢測(cè)到亞納米級(jí)別的位移 用于遠(yuǎn)程操控的自動(dòng)閥 無位移偏差 單分子測(cè)量零干擾 多達(dá)11個(gè)注射器可以接到流動(dòng)池上來實(shí)現(xiàn)復(fù)雜的多重蛋白分析 | C-Trap便捷直觀的雙屏顯示界面給您的實(shí)驗(yàn)操作帶來*便利;您可通過手動(dòng)點(diǎn)擊操縱桿或通過簡(jiǎn)單的命令來自動(dòng)控制諸如光阱位置,平臺(tái)位置,微流體以及數(shù)據(jù)記錄等過程。以用戶為中心的軟件操作界面以及簡(jiǎn)易的操作流程使復(fù)雜的單分子實(shí)驗(yàn)過程(微球捕獲,分子的連接,隨后的操縱以及成像整個(gè)過程)在數(shù)分鐘之內(nèi)即可完成。 |
文獻(xiàn)列表
1.Brouwer et al. Sliding Sleeves of XRCC4-XLF Bridge DNA and Connect Fragments of Broken DNA. Nature. 2016. Vol 535.
2.Candelli et al. Visualization and quantification of nascent RAD51 filament formation at single-monomer resolution. PNAS. 2014
3.Heller et al. STED nanoscopy combined with optical tweezers reveals protein dynamics on densely covered DNA. Nature. 2013.
4.Kurniawan et al. Fibrin Networks Support Recurring Mechanical Loads by Adapting their Structure across Multiple Scales. Biophysical Journal. 2016.
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