CellSorter計算機控制的自動化微吸管系統(tǒng)
背景：
通常情況下，分子生物學研究都是針對組織樣本或者一個細胞群來進行。然而，組織樣本中一般包含多種類型的細胞，即使來自于同一個細胞群的各個細胞間的基因水平、表達水平會存在不同程度的差異，互為異質(zhì)細胞。以組織或細胞群為起始樣本的研究，可能會因為細胞異質(zhì)性而獲得錯誤的結(jié)果。以腫瘤發(fā)生為例，腫瘤的發(fā)生是單細胞中多種突變積累演化的結(jié)果，一個腫瘤組織中往往會包含處于不同階段的腫瘤細胞甚至前腫瘤細胞。采取組織樣本進行研究，稀有卻重要的基因突變很可能淹沒在背景數(shù)據(jù)中，而采用單細胞進行實驗則可避免上述的情況出現(xiàn)，獲得更可靠更有意義的結(jié)果。
單細胞實驗在腫瘤、干細胞、神經(jīng)、生殖、微生物學等多個領域以及法醫(yī)學中應用廣泛，主要是基于以下特點：
單細胞亦包含一個物種全部的遺傳信息；
單細胞實驗避免了細胞異質(zhì)性的干擾，準確性更高。
單細胞實驗有利于還原生物事件本身，諸多生物事件如胚胎發(fā)育、腫瘤形成及轉(zhuǎn)移等均以單細胞為起點。
概述
匈牙利Cellsorter公司推出的單細胞獲取平臺為獲取單細胞提供了完整的解決方案—全自動 Cellsorter單細胞分選系統(tǒng)。
Cellsorter可從血液、骨髓、制備的組織細胞懸浮等液態(tài)體系中挑選出感興趣的單細胞
cellsorter單細胞分選系統(tǒng)以顯微鏡為基礎，采用毛細管技術(shù)從少量樣本中分離單細胞和稀有細胞的自動細胞分選系統(tǒng)，操作步驟是由軟件控制。
整個過程分為三個步驟：
1．細胞識別
2．細胞獲取
3．細胞沉積
產(chǎn)品詳細描述
facsinapetri細胞分選系統(tǒng)是Cellsoter公司一款主要用于識別、挑取、轉(zhuǎn)移懸液中單細胞或者單一類型細胞。借助高清晰度的CCD 攝像機成像，操作者可直觀看到目的細胞，隨后通過操控軟件控制毛細管高效地完成對懸浮細胞或者是貼壁細胞的挑取及轉(zhuǎn)移。整個過程可視化，操作簡單，挑取準確。對于各種類型的單個細胞挑取游刃有余。
該系統(tǒng)通過細胞識別、細胞挑取和細胞轉(zhuǎn)移三個步驟可以實現(xiàn)對懸浮體系中任何單一類型細胞或稀有細胞（如循環(huán)腫瘤細胞、內(nèi)皮細胞、干細胞以及血液、骨髓中相關(guān)細胞等）的分離，細胞可以轉(zhuǎn)移到PCR管等后續(xù)實驗裝置.
該系統(tǒng)以“所見即所得”的方式，幾乎涵蓋所有的單細胞獲取途徑，結(jié)合單細胞擴增儀和相關(guān)耗材可進行下游基因、蛋白水平的研究。
facs in a petri 全自動單細胞分選沉積系統(tǒng)在培養(yǎng)碟中原位自動分選細胞，具有高精度、細胞存活率高、純度高，而且不破壞細胞組織的特性，是高精準、全自動分選沉積單細胞的*
該系統(tǒng)采用一個微量吸管，可輕松從培養(yǎng)中高精準、全自動分選單個細胞。 CellSorter軟件自動掃描載物臺上感興趣的區(qū)域，并自動檢測熒光的細胞。
幾秒鐘內(nèi)該系統(tǒng)就可以看到培養(yǎng)中標明所檢測到細胞的地圖, 軟件計算出訪問所有檢測到的細胞路徑并使用微量吸管把它們分揀出來。
被檢測到的細胞從培養(yǎng)皿中通過玻璃微量吸管被自動拾取分揀出來。
您也可以手動檢測細胞，手動或自動事后對其進行分選。用戶可以評估和修訂自動細胞檢測.
我們證實了顯微鏡觀測到的無論熒光標記還是未標記的活細胞，在培養(yǎng)皿中都可以可通過計算機系統(tǒng)可視化地被自動識別并拾取由一個計算機控制的微量吸移管固定到所述物鏡。
細胞從培養(yǎng)皿中以每秒1細胞的速度可連續(xù)分選分揀1000個。
這種方法可以作為流式細胞分選降低到單個細胞具有非常高的選擇性，并開啟了通過計算機可視化進行在單細胞水平自動操縱單細胞方式。
分選細胞的高分辨率，即兩個細胞其中一個可以被選擇性地除去之間的小距離是50-70微米，正如我們在特定實驗中使用的微量吸吮管。
?CellSorter計算機控制的自動化微吸管系統(tǒng)
該設備將能夠自動、輕松、高精準地收集分揀到的單細胞用于進一步培養(yǎng)，克隆，RNA或蛋白質(zhì)制備以及免疫組化制備后的分選固定細胞。
傳統(tǒng)的熒光活化細胞分選方法（FACS）采用流式細胞術(shù)用來分選細胞，是分子基礎分選中普遍使用的方法。這種方法只能檢測具有熒光活性的細胞，不但細胞存活率低、純度低，而且極易破壞細胞組織。CellSorter 全自動*，是一款與倒置顯微鏡配合使用的，用于細胞篩選、提取、沉積的理想設備。該系統(tǒng)可以靈活的與各種類倒置顯微鏡配合，安裝操作也非常簡單。如果用戶已經(jīng)擁有自己的顯微鏡系統(tǒng)，只需購買標準配件就可以將現(xiàn)有的系統(tǒng)升級為一套多功能的細胞分選平臺。
整套系統(tǒng)包含了配有數(shù)碼相機的倒置顯微鏡，二維顯微鏡機動載物臺，一維機動顯微操縱器，CellSorter 控制單元，和*。我們采用液體靜壓力方式進行細胞沉積，微量吸液管連接到一個可旋轉(zhuǎn)的顯微鏡操作臂，可從35mm 的培養(yǎng)皿中提取細胞，并且沉積到玻璃載片或者80PCR管中。
傳統(tǒng)的熒光活化細胞分選方法（FACS）采用流式細胞術(shù)用來分選細胞，是分子基礎分選中普遍使用的方法。
這種方法只能檢測具有熒光活性的細胞，不但細胞存活率低、純度低，而且極易破壞細胞組織。
FACS IN A PETRI 培養(yǎng)碟中原位自動單細胞分選沉積系統(tǒng)，是一款與倒置顯微鏡配合使用的，用于細胞篩選、提取、沉積的理想設備。
該系統(tǒng)可以靈活的與各種類倒置顯微鏡配合，安裝操作也非常簡單。如果用戶已經(jīng)擁有自己的顯微鏡系統(tǒng)，
只需購買標準配件就可以將現(xiàn)有的系統(tǒng)升級為一套多功能、全自動、高精準、高存活率、高純度的細胞分選、沉積平臺。
系統(tǒng)亮點概述
◇ 可直接從培養(yǎng)皿中進行細胞分選
◇高精準、高純度、高存活率全自動
◇ 分離粘結(jié)活細胞的細胞亞群，分離熒光或者冷光標記
◇ 無標記的和熒光的細胞都可通過軟件進行自動識別
◇ 可確保細胞分離后活力，并且可培養(yǎng)
◇ 分選熒光分子探針標記的特定細胞
◇ 單細胞收集進行進一步培養(yǎng)、克隆，RNA 或者蛋白質(zhì)制備
◇ 免疫制備，進行目標細胞分類
◇ 可對各種粘結(jié)細胞進行分類
◇ 細胞篩選前的細胞培養(yǎng)
◇ 一般的分選過程只需幾分鐘就可完成
◇ 使用安裝在顯微鏡上的熒光濾片可實現(xiàn)多通道監(jiān)測
◇ 分選速度：1Cell/秒，每一個循環(huán)可篩選細胞個數(shù)：1~1000
◆ 兼容所有的倒置顯微鏡
◆ 快速手動調(diào)節(jié)通過LED 照明光源
◆ 分選針頭更換快速、便捷
◆ 可通過連接環(huán)完美的安裝到顯微鏡的物鏡上
3、適用范圍
全自動*使用微量吸液管對細胞進行分選，微量吸液管內(nèi)孔徑范圍為50~80um；
可根據(jù)客戶的應用提供內(nèi)孔徑方案；更小的微移液管可達亞微米級，用于大分子的操縱
在虛擬的培養(yǎng)皿中，熒光細胞被標記為綠色小球，通過微量吸液管對細胞進行提取。
控制臺通過物鏡環(huán)固定在物鏡上方，玻璃微量吸液管被固定在控制臺中心光軸位置。
微量吸液管頂端通過LED 燈照射，照射光通過微量吸液管直接被引入到物鏡。
微量吸液管可通過手動調(diào)節(jié)彈簧旋鈕上下移動到物鏡焦點位置。
培養(yǎng)皿可以進行水平移動，微量吸液管上端通過撓性導管連接到*上。
全自動*控制臺可通過計算機USB 接口控制流體閥和顯微LED 照明光源，
同時也可以自由地控制顯微鏡熒光快門，并且整合了高速控制閥實現(xiàn)流體快速、精密控制。
4、參數(shù)
2D 自動控制顯微鏡平臺和自動聚焦單元：SCAN IM 130 x 100mm（掃描范圍）MA-42 變速控制單元
Tango 3 PCI-S Controller 三軸控制器
1D 自動顯微操縱單元
12 位冷卻型熒光CCD 相機：分辨率1600X1200 pixels
*：注射率0.73ul/hr (1cc)到2100ml/hr (60cc)
Dell 工作站，用于控制*系統(tǒng)
高分辨顯示積功能：
◆ 單細胞輸器，全高清分辨（1920×1080）
自動單細胞沉積功能：
◆ 單細胞輸送到達每一個PCR 管
◆ 滴液體積小于1ul
◆ 一個循環(huán)可裝滿80 個PCR 管
◆ 每個Cell 沉積時間15~20 秒
◆ 可在一個玻璃蓋玻片上原位測試單個細胞沉積
◆ 分選速度：1Cell/秒，每一個循環(huán)可篩選細胞個數(shù)：1~1000
5、使用方法
全自動*配備高精度微移液管支架，控制臺始終保證微量吸液管位于視場的正中心，
并且微移液管控制臺可非常容易地安裝在物鏡上，同時軟件可對移液管的位置進行偏差校準。
微移液管的可通過轉(zhuǎn)動控制臺的旋鈕進行手動聚焦，且微移液管的可在顯微鏡中非常容易的被觀察到，
同時顯微鏡的圖像可跟進調(diào)整；玻璃微移液管更換非常便捷，當更換培養(yǎng)皿時簡單地取下來分選針頭即可。
該系統(tǒng)采用液體靜壓力方式進行細胞沉積，微量吸液管連接到一個可旋轉(zhuǎn)的顯微鏡操作臂,
可從35mm的培養(yǎng)皿中提取細胞，并且沉積到玻璃載片或者PCR管中。
6、系統(tǒng)組成部分
1）自動顯微移液管控制和聚焦單元及樣品臺
2）相關(guān)附件和液體管(5 個微移液管，用于單個細胞操控)
3）2D 自動控制顯微鏡平臺和自動聚焦單元
4）1D 自動顯微操縱單元
5）12 位冷卻型熒光CCD 相機：
6）*
7）預裝基于Windows操作系統(tǒng)的Cellsort分選分析軟件系統(tǒng)的計算機以及高分辨顯示器
