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NADP山li醇脫氫酶(NADP+-SDH)試劑盒,微板法

參考價(jià)	￥1030.00

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￥1030.00

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公司名稱上海宇淳生物科技有限公司
品牌其他品牌
型號(hào)
所在地上海市
廠商性質(zhì)經(jīng)銷商
更新時(shí)間2024/5/20 10:41:02
訪問次數(shù)259

產(chǎn)品標(biāo)簽:

NADP+-SDH試劑盒

規(guī)格

96T

1030.00元

99 盒可售

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上海宇淳生物科技有限公司是一家致力于生物技術(shù)服務(wù)、實(shí)驗(yàn)試劑和耗材銷售，有專業(yè)的科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)人員。承接免疫學(xué)、分子學(xué)、細(xì)胞學(xué)、病理學(xué)、動(dòng)物造模等技術(shù)實(shí)驗(yàn)，可為高校醫(yī)院及科研單位提供包括病理學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等技術(shù)服務(wù)，并建立了包含實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)項(xiàng)目實(shí)施結(jié)果整理數(shù)據(jù)分析及策略咨詢等一站式的科研服務(wù)。本公司還代理許多先進(jìn)水平的產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、診斷等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó)，在同行獲得*好評(píng)。特別是生物試劑和細(xì)胞產(chǎn)品更是種類齊全、價(jià)格實(shí)惠。主營(yíng)產(chǎn)品/服務(wù):試劑盒：ELISA試劑盒、免疫組化試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒。細(xì)胞：美國(guó)*原代細(xì)胞，細(xì)胞系，細(xì)胞株，專業(yè)培養(yǎng)基，常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基，耗材：細(xì)胞培養(yǎng)耗材、普通實(shí)驗(yàn)耗材。生化試劑：*生化試劑、進(jìn)口分裝生化試劑、國(guó)產(chǎn)生化試劑。抗體：進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗等等。公司的理念是：為您提供*的產(chǎn)品及服務(wù)，產(chǎn)品價(jià)格較好的競(jìng)爭(zhēng)力。

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NADP山li醇脫氫酶(NADP+-SDH)試劑盒,微板法
我公司所銷售的ELISA試劑盒,品種多，質(zhì)量好，靈敏度高,涉及的品牌有美國(guó)原裝/分裝等不同價(jià)格檔次的盒子。
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NADP山li醇脫氫酶(NADP+-SDH)試劑盒,微板法產(chǎn)品信息

NADP山li醇脫氫酶(NADP+-SDH)試劑盒,微板法

本試劑盒僅供科研使用

NADP+ -山li醇脫氫酶活性測(cè)定試劑盒說明書

（貨號(hào)：WS3750W 微板法 96 樣）

一、產(chǎn)品簡(jiǎn)介：山li醇脫氫酶（sorbitol dehydrogenase，SDH）催化山li醇脫氫生成果糖，是調(diào)控生物體內(nèi)山li醇含量的關(guān)健酶之一，依據(jù)依賴的輔酶分為 NADP+依懶性山li醇脫氫酶（NADP+ -SDH，EC 1.1.1.B60）和 NAD+依懶性山li醇脫氫酶（NAD+ -SDH）， NADP+ -SDH 催化山li醇轉(zhuǎn)化成葡萄糖，NAD+ -SDH 催化山li醇轉(zhuǎn)化成果糖。 NADP + -SDH 催化山li醇脫氫生成葡萄糖，同時(shí)還原 NADP +生成 NADPH，測(cè)定 340nm 吸光度增加速率可以計(jì)算 NADP + -SDH 酶活性大小。二、試劑盒組成和配制：試劑名稱規(guī)格保存要求備注提取液液體 100mL×1 瓶 4℃保存試劑一粉劑 mg×1 支 4℃保存臨用前甩幾下使粉劑落入底部，再加 1.1mL 蒸餾水溶解備用。試劑二液體 20mL×1 瓶 4℃保存試劑三粉劑 mg×1 支 4℃保存臨用前甩幾下使粉劑落入底部，再加 1.1mL 蒸餾水溶解備用。三、所需的儀器和用品：酶標(biāo)儀、96 孔板、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。四、NADP + -山li醇脫氫酶（NADP + -SDH）活性測(cè)定：建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定，了解本批樣品情況，熟悉實(shí)驗(yàn)流程，避免實(shí) 驗(yàn)樣本和試劑浪費(fèi)！ 1、樣本制備： ① 組織樣本：稱取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.5g），加入 1mL 提取液，進(jìn)行冰浴勻漿。 12000rpm 4℃離心 15min，取上清，置冰上待測(cè)。【注意】若樣本顏色較深（如植物葉片），可引起起始值 A1 值較大如超過 1.6，可在樣本制備過程中增加除色素步驟：取約 0.1g 組織（水分充足的樣本可取 0.5g），加入 80%乙醇冰浴勻漿，12000rpm， 4℃離心 10min，棄掉色素較深的上清液；以上除色素步驟重復(fù) 2 次。最后向離心得到的沉淀中加入 1mL 提取液，混勻或再次冰浴勻漿，12000rpm，4℃離心 10min，取上清置冰上待測(cè)。 ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本：先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；取 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液；超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復(fù) 30 次）；4oC 約 12,000rpm 離心 10min，取上清作為待測(cè)樣品。【注】：若增加樣本量，可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量（104）：提取液（mL）為 500~1000：1 的比例進(jìn)行提取。 3 液體樣本：澄清的液體樣本直接檢測(cè)；若渾濁離心后取上清檢測(cè)。 2、上機(jī)檢測(cè)： ① 酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，設(shè)置溫度 25℃,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 340nm。 ② 所有試劑放在 25℃水浴 5min； ③ 在 96 孔板中依次加入：試劑名稱（μL）測(cè)定管樣本 20本試劑盒僅供科研使用 2 試劑一 10 試劑二 160 混勻，25℃下孵育 10min 試劑三 10 混勻，25℃下，20s 時(shí)于 340nm 處讀取 A1， 20min 后讀取 A2。ΔA=A2-A1。【注】：若ΔA 過小，可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間（如：60min 或更長(zhǎng)）再讀取 A2，或加大樣本體積 V1（如增至 40μL，則試劑二相應(yīng)減少），重新調(diào)整的反應(yīng)時(shí)間 T 和加樣體積 V1 需代入計(jì)算公式重新計(jì)算。五、結(jié)果計(jì)算： 1. 按樣本蛋白濃度計(jì)算：酶活定義：每毫克組織蛋白每分鐘生成 1 nmol NADPH 定義為一個(gè)酶活力單位。 NADP + -SDH(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(V1×Cpr)÷T=160.8×ΔA÷Cpr 2. 按樣本鮮重計(jì)算：酶活定義：每克組織每分鐘生成 1 nmol NADPH 定義為一個(gè)酶活力單位。 NADP + -SDH(nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(W×V1÷V)÷T=160.8×ΔA÷W 3. 按細(xì)菌或細(xì)胞密度計(jì)算：酶活定義：每 1 萬(wàn)個(gè)細(xì)菌或細(xì)胞每分鐘生成 1 nmol NADPH 定義為一個(gè)酶活力單位。 NADP + -SDH(nmol/min/104 cell)=[ΔA×V2÷(ε×d)×109]÷(500×V1÷V)÷T=0.32×ΔA 4. 按照液體體積計(jì)算酶活定義：每毫升液體每分鐘生成 1 nmol NADPH 定義為一個(gè)酶活力單位。 NADP + -SDH(nmol/min/mL)=[ΔA×V2÷(ε×d）×109]÷V1÷T=160.8×ΔA ε---NADPH 摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L/mol/cm； d---96 孔板光徑，0.5cm； V---加入提取液體積，1 mL； V1---加入樣本體積，0.02 mL； V2---反應(yīng)體系總體積，2×10-4 L； T---反應(yīng)時(shí)間，20 min； 500---細(xì)菌或細(xì)胞總數(shù)，500 萬(wàn)； W---樣本質(zhì)量； Cpr---樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；建議使用本公司的 BCA 蛋白含量檢測(cè)試劑盒。