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抗核糖體蛋白(Ribosomal P) 酶免試劑盒

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  • 公司名稱(chēng)上海ELISA試劑盒 研鑫試劑科研網(wǎng)
  • 品       牌
  • 型       號(hào)48T/96T
  • 所  在  地上海市
  • 廠(chǎng)商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
  • 更新時(shí)間2016/8/9 21:54:04
  • 訪(fǎng)問(wèn)次數(shù)348
產(chǎn)品標(biāo)簽:

抗核糖體蛋白Ribosomal P 酶免試劑盒

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人ELISAkit , 酶聯(lián)免疫試劑盒,試劑盒銷(xiāo)售,試劑盒原理,elisa法
上海研鑫生物科技有限公司專(zhuān)業(yè)提供科研類(lèi)進(jìn)口原裝、進(jìn)口分裝全系列ELISA試劑盒,是多家科研機(jī)構(gòu)和高校ELISA試劑盒供應(yīng)商,歡迎各位新老客戶(hù)惠顧!如需咨詢(xún)相關(guān)產(chǎn)品信息,在線(xiàn)客服 更多相關(guān)產(chǎn)品請(qǐng)點(diǎn)擊公司:www.shyxsw.net
抗核糖體蛋白(Ribosomal P) 酶免試劑盒 產(chǎn)品信息

抗核糖體蛋白(Ribosomal P) 酶免試劑盒

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ELISA的方法類(lèi)型和操作步驟如下:ELISA可用于測(cè)定抗原,也可用于測(cè)定抗體。在這種測(cè)定方法中有3種必要的試劑:①固相的抗原或抗體,②酶標(biāo)記的抗原或抗體,③酶作用的底物。根據(jù)試劑的來(lái)源和標(biāo)本的性狀以及檢測(cè)的具備條件,可設(shè)計(jì)出各種不同類(lèi)型的檢測(cè)方法。
 ?。ㄒ唬╇p抗體夾心法
  雙抗體夾心法:是檢測(cè)抗原zui常用的方法,操作步驟如下:
 ?。?)將特異性抗體與固相載體連接,形成固相抗體:洗滌除去未結(jié)合的抗體及雜質(zhì)。
 ?。?)加受檢標(biāo)本:使之與固相抗體接觸反應(yīng)一段時(shí)間,讓標(biāo)本中的抗原與固相載體上的抗體結(jié)合,形成固相抗原復(fù)合物。洗滌除去其他未結(jié)合的物質(zhì)。
  (3)加酶標(biāo)抗體:使固相免疫復(fù)合物上的抗原與酶標(biāo)抗體結(jié)合。*洗滌未結(jié)合的酶標(biāo)抗體。此時(shí)固相載體上帶有的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量正相關(guān)。
 ?。?)加底物:夾心式復(fù)合物中的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)顏色反應(yīng)的程度進(jìn)行該抗原的定性或定量。
  根據(jù)同樣原理,將大分子抗原分別制備固相抗原和酶標(biāo)抗原結(jié)合物,即可用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中的抗體。
  操作步驟
  1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為9U/L,6U/L,3U/L,1.5U/L,0.75U/L)。
  2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
  3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
  7. 溫育:操作同3。
  8. 洗滌:操作同5。
  9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行
  每個(gè)試劑盒操作是不同的,請(qǐng)按說(shuō)明書(shū)操作。具體事項(xiàng)請(qǐng)!
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