蜂蜜中羥甲基糠醛檢測方案原理：蜂蜜樣品中的羥甲基糠醛經(jīng)HPLC反相色譜柱分離，用液相色譜儀紫外檢測器檢測。用標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量。
檢測方法：GB/T 18932.18-2003
測定步驟
試樣處理
稱取 10 g 試樣，精確至。0.01g，置于100m L燒杯中，加人10m L甲醉（4.2），用玻璃棒輕輕攪拌均勻，使試樣*溶解。轉(zhuǎn)移至lOO mL容量瓶中，用水釋稀至刻度，充分混勻。用0.45um的濾膜過濾，濾液用于液相色譜儀紫外檢測器測定。
液相色譜條件
a）色譜柱:DiamonsilC ,a5 p m,250m mX4.6 mmG.d ）或相當(dāng)者;
b）流動相:甲醇+水（10十90）;
c）流速:1.0 m L/min;
d）檢測波長:285n m;
e）柱溫:300C;
f）進(jìn)樣量:10p L.
液相色譜測定
首先測定七個標(biāo)準(zhǔn)工作溶液（4.6）在上述色譜條件下的峰面積，以峰面積對相應(yīng)濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，然后測定未知樣品，用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線對樣品進(jìn)行定量。樣品溶液中羥甲基糠醛的響應(yīng)值應(yīng)在儀器的線性范圍內(nèi)。在上述色譜條件下，羥甲基糠醛的參考保留時間約為12 min.
平行試驗(yàn)
按上述步驟，對同一試樣進(jìn)行平行試驗(yàn)測定。
空白試驗(yàn)
按上述步驟，對10%的甲醇溶液進(jìn)行測定。
添加試驗(yàn)
每批樣品應(yīng)至少進(jìn)行一個樣品的添加試驗(yàn)。稱取10g試樣，精確至0.Olg，添加1.O mL羥甲基糠醛標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，加9.9mL甲醇溶解，其他步驟按試樣處理步驟進(jìn)行。
結(jié)果按式（1）計(jì)算:
X=c*（v/m）*（1000/1000）.一（1）
式中:
X— 試樣中羥甲基糠醛含量，單位為毫克每千克（mg/kg） ;
c— 從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線上得到的被測組分溶液濃度，單位為微克每毫升（ug/mL） ;
V— 定容體積，單位為毫升（mL） ;
m— 樣液所代表試樣的質(zhì)量，單位為克（9）
注:計(jì)算結(jié)果應(yīng)扣除空白值。
本部分的精密度數(shù)據(jù)是按照GB/T 6379的規(guī)定確定的，其重復(fù)性和再現(xiàn)性的值是以95%的可信度來計(jì)算。
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