黑豆蚜胞內(nèi)共生菌對(duì)日本柄瘤蚜繭蜂發(fā)育和繁殖的影響

黑豆蚜用蠶豆苗飼養(yǎng)，日本柄瘤蚜繭蜂的日常飼養(yǎng)是在蚜蟲2-3齡時(shí)接蜂，接蜂時(shí)間24小時(shí)。溫度23-25℃，光周期16:8。

日常飼養(yǎng)的黑豆蚜是有共生細(xì)菌的蚜蟲，稱之為“共生蚜蟲”，其胞內(nèi)共生細(xì)菌的脫除采用飼喂抗生素*的方法。經(jīng)*處理后，脫去共生細(xì)菌的蚜蟲稱為“脫共生蚜蟲”。

共生和脫共生黑豆蚜，在發(fā)育到2齡時(shí)分別接入日本柄瘤蚜繭蜂，接蜂時(shí)間為6h。將寄生蜂移去48h后，每隔24h隨機(jī)取出30頭被寄生的蚜蟲進(jìn)行解剖，并測量蚜繭蜂幼蟲的體長，以檢測寄生蜂在共生和脫共生寄主蚜蟲體內(nèi)的生長和發(fā)育情況。待僵蚜形成后，把僵蚜從葉子上剝下后分別存放于玻璃瓶中，每隔12h進(jìn)行抽樣解剖，觀察蚜繭蜂的發(fā)育。當(dāng)寄生蜂羽化時(shí)，稱量羽化時(shí)成蜂的體重，并統(tǒng)計(jì)成蜂羽化率。

將剛羽化的蚜繭蜂放入備有足量2齡若蚜的產(chǎn)卵籠內(nèi)，同時(shí)供以30%的蜂蜜水，每隔24小時(shí)換一次蚜蟲，直到蚜繭蜂死亡，記錄死亡時(shí)間，計(jì)算蚜繭蜂的壽命。每次換籠48小時(shí)后解剖處理蚜蟲，以寄生蜂的初孵幼蟲數(shù)計(jì)算成蜂的產(chǎn)卵量。

蚜繭蜂產(chǎn)卵96h后，被寄生的蚜蟲已有顯著的外部特征，這時(shí)，挑取被寄生的蚜蟲，稱重后提取總蛋白，提取使用Wilkinson （2001）的方法。蚜蟲組織中總蛋白含量的測定按Bradford （1976）的方法進(jìn)行。

蚜蟲組織中游離氨基酸的提取見Douglas （1996）的方法；游離氨基酸測定用日立835-50型氨基酸自動(dòng)分析儀。