大鼠抗內(nèi)皮細胞抗體(AECA)ELISA試劑盒技術操作步驟:雙抗體夾心法
包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
大鼠抗內(nèi)皮細胞抗體(AECA)ELISA試劑盒技術雙抗夾心法測抗圖:
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人阿黑皮素原(POMC)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
人分泌性白細胞蛋白酶抑制因子(SLPI)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
人*還原酶(GR)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
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人微管關聯(lián)蛋白4(MAP4)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
人胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
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人鈣調(diào)磷酸酶(CaN)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
人神經(jīng)絲蛋白3(NEF3)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
人生長關聯(lián)蛋白43(GAP43)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
人微管關聯(lián)蛋白2(MAP2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
注意要點:請仔細閱讀大鼠抗內(nèi)皮細胞抗體(AECA)ELISA試劑盒技術的詳細使用說明,嚴格遵照規(guī)定操作,必能得出準確的結果。