轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控,含EGFP基因的CHO細(xì)胞,CHO-AA10細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開始轉(zhuǎn)入Tet-off調(diào)控,含EGFP基因的CHO細(xì)胞,CHO-AA10細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
TC-hxbz-244 人膀胱癌細(xì)胞 EJ
TC-hxbz-245 人膀胱癌細(xì)胞 5637(HTB-9)
TC-hxbz-246 人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞 T24
TC-hxbz-247 人膀胱鱗癌細(xì)胞 ScaBER
TC-hxbz-248 人膀胱癌細(xì)胞 BIU-87
TC-hxbz-249 人膽管癌細(xì)胞 RBE
TC-hxbz-250 人膽管癌細(xì)胞 QBC939
TC-hxbz-251 人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7
TC-hxbz-252 人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7(NEW)
TC-hxbz-253 人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7(OLD)
TC-hxbz-254 人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7/ER36
TC-hxbz-255 人乳腺癌細(xì)胞(耐*) MCF-7/ADR
TC-hxbz-256 人乳腺癌細(xì)胞 MCF-7B
TC-hxbz-257 人乳腺癌細(xì)胞 SKBr-2HL
TC-hxbz-258 人乳腺癌細(xì)胞 ZR75-1
TC-hxbz-259 人乳腺癌細(xì)胞 ZR75-30
TC-hxbz-260 人乳腺癌細(xì)胞 MDA-MB-231