人顱骨成骨細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開始人顱骨成骨細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶內(nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
xy-E12499 大鼠一氧化氮合成酶(NOS)ELISA試劑盒
xy-E12500 大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA試劑盒
xy-E12501 大鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成酶(eNOS)ELISA試劑盒
xy-E12502 大鼠脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒
xy-E12503 大鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒
xy-E12504 大鼠熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒
xy-E12505 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒
xy-E12506 大鼠熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒
xy-E12507 大鼠β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA試劑盒
xy-E12508 大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒
xy-E12509 大鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA試劑盒
xy-E12510 大鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒
xy-E12511 大鼠髓磷脂堿性蛋白(MBP)ELISA試劑盒
xy-E12512 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒
xy-E12513 大鼠前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA試劑盒
xy-E12514 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA試劑盒
xy-E12515 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)ELISA試劑盒
xy-E12516 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125ELISA試劑盒