細(xì)胞株名稱:小鼠單核細(xì)胞-巨噬胞
細(xì)胞編號(hào):MN0007
代號(hào):RAW264.7
培養(yǎng)液:DMEM 10%
細(xì)胞形態(tài):500
【小鼠單核細(xì)胞-巨噬胞】傳代操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液??刂拼荡虻牧Χ龋苊猱a(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶內(nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
常見問題及解決方案
1)培養(yǎng)瓶有破裂,培養(yǎng)液有漏液:細(xì)胞*可能會(huì)污染,所以我們會(huì)及時(shí)安排幫老師解決。
2)細(xì)胞漂?。号囵B(yǎng)瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養(yǎng)箱。次日觀察,如細(xì)胞大部分又貼回瓶底,表明細(xì)胞活力正常,剩余漂浮的細(xì)胞可以去掉,留10ml培養(yǎng)液培養(yǎng)觀察,細(xì)胞生長至匯合度80%,進(jìn)行消化傳代;如細(xì)胞還是不貼壁,將細(xì)胞離心收集轉(zhuǎn)到新培養(yǎng)瓶,原培養(yǎng)瓶加部分培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng),中間注意觀察,我們的技術(shù)人員會(huì)一直跟蹤指導(dǎo),直到問題解決。
我公司保證細(xì)胞純度在90%以上;同時(shí)也需經(jīng)過微生物檢測,《 》保證不含有HIV、HBV、HCV、支原體、真菌及其他類型的細(xì)菌。
購買細(xì)胞時(shí)注意事項(xiàng):
1)收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。
2)仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3)用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
及相關(guān)優(yōu)勢產(chǎn)品:
MN0007 | RAW264.7 | DMEM 10% | |
MN0008 | PA317 | DMEM 10% | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 |
MN0009 | CHO/ dhfr- | DMEM 10%100xHT: 13.6mg H, 3.87mg T in 10ml H2O | 倉鼠卵巢(缺陷型) |
MN0010 | CHO* | DMEM 10% | 倉鼠卵巢 |
MN0011 | COS-7 | 1640 10% | 猴腎 |
MN0012 | Vero | 1640 10% | 非洲綠猴腎 |
MN0013 | CFSC | DMEM(10%FBS) | 貯脂細(xì)胞株 |
MN0014 | 208F | 大鼠成纖維細(xì)胞 | |
MN0015 | Cho-K1 | 倉鼠卵巢細(xì)胞亞株 | |
MN0016 | LLC-PK1 | 豬腎近曲小管上皮細(xì)胞 | |
MN0017 | NIH-3T3 | 小鼠成纖維細(xì)胞 | |
MN0018 | WEHI-231 | 小鼠B淋巴細(xì)胞 | |
MN0019 | HOC | 大鼠肝卵圓細(xì)胞 | |
MN0020 | PK(15) | 豬腎上皮細(xì)胞 | |
MN0021 | MDCK | 狗腎上皮細(xì)胞 | |
MN0022 | 3D4/21 | 豬肺泡巨噬細(xì)胞 | |
MN0023 | MEF | 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 | |
MN0024 | C2C12 | 小鼠成肌細(xì)胞 | |
MN0025 | 2T3 | 小鼠成骨細(xì)胞 | |
MN0026 | V79 | 倉鼠肺細(xì)胞 | |
MN0027 | BRL | 大鼠肝細(xì)胞 |
由萬疆生物專業(yè)提供,同時(shí)還提供了完善的售后服務(wù) 歡迎廣大客戶前來咨詢訂購!上海萬疆生物銷售直線-189 1843 6805。