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所 在 地上海市
更新時間:2015-11-06 16:14:59瀏覽次數(shù):260次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線HCC1428人乳腺癌細胞株另:本公司代購美國ATCC,美國sciencell, 丹麥IBT,日本MBIC,Invitrogen, Millipore,德國細胞庫,ECACC,ICLC,DSMZ的細胞株以及菌株。齊一生物科技(上海)有限公司:.Web:www.qiyibio。。com
HCC1428人乳腺癌細胞株細胞培養(yǎng)方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經(jīng)驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度 5%CO2 培養(yǎng)
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
間型酒香酵母ACCC20233
葡萄芽假絲酵母ACCC20201
近平滑假絲酵母ACCC20221
熱帶假絲酵母ACCC20005
產(chǎn)朊假絲酵母ACCC20060
漢遜德巴利酵母ACCC20010
健強地霉ACCC20017
阿拉伯糖醇漢遜酵母ACCC20205
杰丁漢遜酵母ACCC20019
土星漢遜酵母ACCC20020
粉狀畢赤酵母ACCC20026
粘紅酵母ACCC20030
深紅酵母ACCC20252
滅酵母ACCC20200
卡爾斯伯酵母ACCC20166
糖化酵母ACCC20204
清酒酵母ACCC20045
許旺酵母ACCC20194
泡盛曲霉ACCC30368
臭曲霉ACCC30126
煙曲霉ACCC30367
黑曲霉ACCC30005
米曲霉ACCC303163
海棗曲霉ACCC30164
塔賓曲霉ACCC30165
宇佐美曲霉ACCC30339
金龜子綠僵菌ACCC30104
白僵菌ACCC30006
葡萄孢ACCC30384
頭孢霉ACCC30146
金龜子綠僵菌小孢變種ACCC30194、NRRL13969
綠色木霉=木素木霉ACCC30169、IFFI3035
黃綠綠僵菌ACCC30196、NRRL13971
黃綠綠僵菌ACCC30199、NRRL20422
大孢綠僵菌/金龜子綠僵菌大孢變種ACCC30195、NRRL13970
金龜子綠僵菌ACCC30131
平沙綠僵菌ACCC30105
紅曲霉ACCC30342
紫紅曲霉ACCC30352
中華根霉ACCC30301
厚孢根霉ACCC30302
哈茨木霉ACCC30371
大麗花輪枝孢ACCC30308
白淺灰鏈霉菌ACCC40001
抗生鏈霉菌ACCC40070
天藍色鏈霉菌ACCC40009
淡天藍色鏈霉菌ACCC40010
Human monocyte chemotactic protein 3,MCP-3 ELISA kit
Human monocyte chemotactic protein 2,MCP-2 ELISA kit
Human L-Selectin ELISA kit
Human Interleukin 9,IL-9 ELISA KIT
Human Interleukin 8,IL-8 ELISA KIT
Human Interleukin 6,IL-6 ELISA KIT
Human Interleukin 5,IL-5 ELISA KIT
Human Interleukin 4,IL-4 ELISA KIT
Human Interleukin 3,IL-3 ELISA KIT
Human Interleukin 2,IL-2 ELISA kit
Human soluble interleukin-2 receptor,IL-2sRα ELISA kit
Human Interleukin 2,IL-2 ELISA kit
Human Interleukin 1α,IL-1α ELISA Kit
Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ,IL-1sRⅡ ELISA kit
Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sRⅠ ELISA kit
Human Interleukin 16,IL-16 ELISA KIT
Human Interleukin 13,IL-13 ELISA KIT
Human Interleukin 12,IL-12P70 ELISA KIT
Human Interleukin 12,IL-12P40 ELISA KIT
Human Interleukin 11,IL-11 ELISA KIT
Human Interleukin 10,IL-10 ELISA KIT
Human insulin-like growth factors binding protein 4,IGFBP-4 ELISA Kit
Human insulin-like growth factors binding protein 3,IGFBP-3 ELISA Kit
Human insulin-like growth factors binding protein 2,IGFBP-2 ELISA Kit
Human insulin-like growth factors binding protein 1,IGFBP-1 ELISA Kit
Human insulin-like growth factors 2,IGF-2 ELISA Kit
Human insulin-like growth factors 1,IGF-1 ELISA Kit
Human Granulocyte-Macrophage Colony Stimulating Factor,GM-CSF ELISA Kit
Human glial cell line-derived neurotrophic factor,GDNF ELISA KIT
Human Granulocyte Colony Stimulating Factor,G-CSF ELISA Kit
Human neutrophil activating protein-2,NAP-2 ELISA Kit
Human fractalkineCX3CL1 ELISA Kit
Human basic fibroblast growth factor 9,bFGF-9 ELISA Kit
Human basic fibroblast growth factor 6,bFGF-6 ELISA Kit
Human basic fibroblast growth factor 4,bFGF-4 ELISA Kit
Human acidic fibroblast growth factor 1,aFGF-1 ELISA Kit
Human Factor-related Apoptosis ligand,FASL ELISA Kit
Human E-Selectin ELISA kit
Human Eotaxin 1 ELISA Kit
Human eosinophil chemotactic factor,ECF ELISA Kit
Human Endocrine gland vascular endothelial growth factor,EG-VEGF ELISA Kit
Human Ciliary Neurotrophic Factor,CNTF ELISA Kit
Human Cluster of differentiation 30,CD30 ELISA Kit
Human CXC-chemokine receptor 1,CXCR1 ELISA Kit
Human XC-chemokine receptor 1,XCR1 ELISA Kit
Human secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC ELISA Kit
Human E-Cadherin,E-Cad ELISA Kit
Human Brain derived neurotrophic facor,BDNF ELISA Kit
Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule,ALCAM ELISA Kit
Human Activin A,ACV-A ELISA Kit
human Neuregulin 1,NRG-1 ELISA Kit
Human Atrial Natriuretic Peptide,ANP ELISA Kit
Human dopamine D2 receptor,D2R ELISA Kit
Human endomorphin-2,EM-2 ELISA Kit
Human α-Endomorphin,α-EP ELISA Kit
Human Inhibin,INH ELISA Kit
Human neuronal apoptosis inhibitory protein,NAIP ELISA Kit
Human Orexin B,OX-B ELISA Kit
Human delta sleep-inducing peptide,DSIP ELISA Kit
Human 6-hydroxydopamine,6-OHDA ELISA Kit
Human atrial natriuretic factor,ANF ELISA Kit
Human myelin protein 2,p2 ELISA Kit
Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide,PACAP ELISA Kit
Human microtubule-associated protein 2,MAP-2 ELISA Kit
Human neurofilament protein,NF ELISA Kit
Human kaliuretic peptide,KP ELISA Kit
Human Neurotensin,NT ELISA Kit
Human Neurokinins B,NKB ELISA Kit
Human dynorphin,Dyn ELISA Kit
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