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SK-HEP-1人肝癌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2015-11-06 16:18:32瀏覽次數(shù):70次

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SK-HEP-1人肝癌細(xì)胞另:本公司代購(gòu)美國(guó)ATCC,美國(guó)sciencell, 丹麥IBT,日本MBIC,Invitrogen, Millipore,德國(guó)細(xì)胞庫(kù),ECACC,ICLC,DSMZ的細(xì)胞株以及菌株。齊一生物科技(上海)有限公司:.Web:www.qiyibio.com

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SK-HEP-1人肝癌細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)方法 
1、收到細(xì)胞,請(qǐng)查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請(qǐng)盡快。
2、收到細(xì)胞,如包裝完好,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況 ,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。
5 、24小時(shí)后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿(mǎn)瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過(guò)5分鐘??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái),加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀,有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度    5%CO2 培養(yǎng)
7.  收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無(wú)機(jī)成分、激素、生長(zhǎng)因子與微量元素)、細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
陰溝腸桿菌CMCC(B)45301
腸埃希氏菌CMCC(B)44103
單核增生性李斯特氏菌CMCC(B)54002
已型副傷寒沙門(mén)氏菌CMCC(B)50094
枯草芽孢桿菌CMCC(B)63501
小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌CMCC(B)52204
粘質(zhì)沙雷伯氏菌CMCC(B)41002
產(chǎn)氣腸桿菌CMCC(B)45103
肺炎克雷伯氏菌CMCC(B)46117
蠟樣芽孢桿菌CMCC(B)63301
短小芽孢桿菌CMCC(B)63202
銅綠假單胞菌CMCC(B)10104
大腸埃希氏菌CMCC(B)44102
鼠傷寒沙門(mén)氏菌CMCC(B)50115
黑曲霉CMCC(B)98003
大腸埃氏菌8099
非01霍亂弧菌Vb0
傷寒沙門(mén)氏菌CMCC(B)50071
德氏乳桿菌保加利亞亞種CICC6045
乳鏈球菌CICC6016
瑞士乳桿菌CICC6024
巴氏醋桿菌巴氏亞種CICCT006
丙酮丁醇梭菌(丙酮丁醇桿菌)CICC8011
白球擬酵母CICC1040
粉狀畢赤酵母CICC1688
斯氏油脂酵母CICC1715
貝酵母CICC1408
綠色木霉=木素木霉CICC13015
康寧木霉CICC13012
紅曲霉CICC5036
平展米曲霉(米曲霉平展變種)CICC2345
亮白曲霉CICC2360
泡盛曲霉CICC2253
泡盛曲霉CICC2252
泡盛曲霉CICC2254
米曲霉CICC2066
黑曲霉CICC2377
米曲霉CICC2080
米曲霉CICC2412
米曲霉CICC2014
莫格球擬酵母CICC1709
魯氏接合酵母CICC1379
米曲霉CICC2412
米曲霉CICC2014
弗氏檸檬酸桿菌CICC20211
謝氏丙酸桿菌CICC10019
許旺酵母變種CCRC20332
大腸桿菌CCRC11447
DSMZ18235
巨大芽孢桿菌ACCC11107
球型芽孢桿菌ACCC11096
枯草芽孢桿菌ACCC10627
黃色短桿菌ACCC11063
產(chǎn)黃纖維單胞菌ACCC11055
保加利亞乳桿菌ACCC10638
干酷乳桿菌ACCC10639
植物乳桿菌ACCC11095
變形桿菌ACCC11002
惡臭假單胞菌ACCC10085
藤黃八疊球菌ACCC11001
乳酸鏈球菌ACCC10653
乳酸鏈球菌ACCC11092
乳酸鏈球菌ACCC11093
乳酸鏈球菌ACCC11094
蠟狀芽孢桿菌ACCC11077
熒光威克酵母ACCC20058
間型酒香酵母ACCC20233
葡萄芽假絲酵母ACCC20201
近平滑假絲酵母ACCC20221
熱帶假絲酵母ACCC20005
產(chǎn)朊假絲酵母ACCC20060
漢遜德巴利酵母ACCC20010
健強(qiáng)地霉ACCC20017
阿拉伯糖醇漢遜酵母ACCC20205
杰丁漢遜酵母ACCC20019
土星漢遜酵母ACCC20020
粉狀畢赤酵母ACCC20026
粘紅酵母ACCC20030
深紅酵母ACCC20252
滅酵母ACCC20200
卡爾斯伯酵母ACCC20166
糖化酵母ACCC20204
清酒酵母ACCC20045
許旺酵母ACCC20194
泡盛曲霉ACCC30368
臭曲霉ACCC30126
煙曲霉ACCC30367
黑曲霉ACCC30005
米曲霉ACCC303163
海棗曲霉ACCC30164
塔賓曲霉ACCC30165
宇佐美曲霉ACCC30339
金龜子綠僵菌ACCC30104
白僵菌ACCC30006
葡萄孢ACCC30384
頭孢霉ACCC30146
金龜子綠僵菌小孢變種ACCC30194、NRRL13969
綠色木霉=木素木霉ACCC30169、IFFI3035
黃綠綠僵菌ACCC30196、NRRL13971
人神經(jīng)激肽B(NKB)檢測(cè)試劑盒
人強(qiáng)啡肽(Dyn)檢測(cè)試劑盒
人腦啡肽(ENK)檢測(cè)試劑盒
人γ肽(Pγ)檢測(cè)試劑盒
人C型鈉尿肽(CNP)檢測(cè)試劑盒
人阿立新A(OrexinA)檢測(cè)試劑盒
人神經(jīng)肽Y(NP-Y)檢測(cè)試劑盒
人腦腸肽(BGPGehrelin)檢測(cè)試劑盒
人腦鈉素腦鈉尿肽(BNP)檢測(cè)試劑盒
人細(xì)胞角蛋白20(CK20)檢測(cè)試劑盒
人β內(nèi)啡肽(β-EP)檢測(cè)試劑盒
人N端前腦鈉素(NT-proBNP)檢測(cè)試劑盒
人前心鈉肽(Pro-ANP)檢測(cè)試劑盒
人細(xì)胞角蛋白13(CK-13)檢測(cè)試劑盒
人細(xì)胞角蛋白17(CK17)檢測(cè)試劑盒
人制瘤素M受體(OSMR)檢測(cè)試劑盒
人B細(xì)胞淋巴瘤因子3(Bcl3)檢測(cè)試劑盒
人癌蛋白誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄物3(OIT3)檢測(cè)試劑盒
人P27蛋白(P27)檢測(cè)試劑盒
人P糖蛋白滲透性糖蛋白(P-gp)檢測(cè)試劑盒
人大腸癌專(zhuān)一抗原3(CCSA-3)檢測(cè)試劑盒
人大腸癌專(zhuān)一抗原2(CCSA-2)檢測(cè)試劑盒
人大腸癌專(zhuān)一抗原4(CCSA-4)檢測(cè)試劑盒
人粘蛋白粘液素5B(MUC5B)檢測(cè)試劑盒
人腸三葉因子(ITF)檢測(cè)試劑盒
人Dickkopf1(DKK1)檢測(cè)試劑盒
人11(KLK11)檢測(cè)試劑盒
人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ黑素瘤生chang刺激因子(GROγCXCL3MGSA)檢測(cè)試劑盒
人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β黑素瘤生chang刺激因子(GROβCXCL2MGSA)檢測(cè)試劑盒
人美麗線(xiàn)蟲(chóng)凋亡基因(CED-3)檢測(cè)試劑盒
人胸腺白血病抗原(TLa)檢測(cè)試劑盒
人腫瘤特異性移植抗原(TSTA)檢測(cè)試劑盒
人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白足盂蛋白(PCX)檢測(cè)試劑盒
人乳腺癌易感蛋白1(BRCA-1)檢測(cè)試劑盒
人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原(TALLA-1CD231)檢測(cè)試劑盒
人核仁形成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NORs)檢測(cè)試劑盒
人硫氧化還原蛋白(Trx)檢測(cè)試劑盒
人窖蛋白(Cav-1)檢測(cè)試劑盒
人普通急性淋巴細(xì)胞白血病抗原(CALLA)檢測(cè)試劑盒
人黑色素細(xì)胞刺激素(MSH)檢測(cè)試劑盒
人表皮角蛋白(EK)檢測(cè)試劑盒
人細(xì)胞角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)檢測(cè)試劑盒
人糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT)檢測(cè)試劑盒
人橋粒芯糖蛋白-1(DSG-E1)檢測(cè)試劑盒
人腫瘤標(biāo)志物(CA724)檢測(cè)試劑盒
人非小細(xì)胞肺癌抗原(LTA)檢測(cè)試劑盒
人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)檢測(cè)試劑盒
人胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)檢測(cè)試劑盒
人本周蛋白(BJP)檢測(cè)試劑盒
人癌胚鐵蛋白(CEF)檢測(cè)試劑盒
人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)檢測(cè)試劑盒
人腫瘤特異性抗原(TSA)檢測(cè)試劑盒
人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)檢測(cè)試劑盒
人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)檢測(cè)試劑盒
人凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)檢測(cè)試劑盒

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