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HK-2人腎近曲小管上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2015-11-07 16:04:30瀏覽次數(shù):229次

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HK-2人腎近曲小管上皮細(xì)胞一、細(xì)胞操作參考書
二、生長特性:貼壁    懸浮
三、細(xì)胞生長條件:
培養(yǎng)基                  90%              (GIBCO)
血清              10%  FBS(GIBCO)
溫度                       37℃
空氣條件      5% CO2,,95% AIR
生長代數(shù)    P4
凍存條件    培養(yǎng)基70%、血清20%、DMSO10%
四、組成:
組份    規(guī)格
細(xì)胞一瓶    T25
細(xì)胞培養(yǎng)與操作說明    1份
五、細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡,請及時(shí)實(shí)驗(yàn)室,技術(shù)人員會跟進(jìn)解決
2.貼壁細(xì)胞生長緩慢:適當(dāng)提高血清濃度(zui高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3.生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

六、細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml  0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?-2min)
2.鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让福?~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存
特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))
1.收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間zui長不宜超過72小時(shí))
2.貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞放置培養(yǎng)箱孵育過夜到第二天再做消化傳代
如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時(shí)做好照片記錄并實(shí)驗(yàn)室
小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞TCM15    S180
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞    T6-Swiss albino
小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞    A9
蚊子細(xì)胞    C6/36
鼠小腦細(xì)胞    C8-D1A
貓腎細(xì)胞    CRFK
貓腎細(xì)胞    F81
中國倉鼠卵巢細(xì)胞    CTLA4 Ig-24
非洲綠猴非洲綠猴腎細(xì)胞    CV-1
牛胚氣管細(xì)胞    EBTr (NBL-4)
恒河猴胚腎細(xì)胞    FRhK-4
大鼠肝癌細(xì)胞    H4-ⅡE
大鼠肝細(xì)胞瘤    H4-II-E-C3
大鼠心肌細(xì)胞    H9c2(2-1)
大鼠腎小球系膜細(xì)胞EC (HBZY-1)    HBZY-1
綠猴恒河猴腎細(xì)胞    LLC-MK2
牛腎細(xì)胞    MDBK (NBL-1)
貂肺上皮細(xì)胞    Mv.1.Lu(NBL-7)
小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞    Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]
大鼠肺泡巨噬細(xì)胞    NR8383
負(fù)鼠腎細(xì)胞    OK
小鼠骨髓瘤細(xì)胞    P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]
小鼠骨髓瘤細(xì)胞    P3X63Ag8.653
豬髖動脈內(nèi)皮細(xì)胞    PIEC
鼠逆轉(zhuǎn)錄酶病毒包裝細(xì)胞    PT67
中國倉鼠倉鼠肺細(xì)胞    R1610
綠猴猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜(內(nèi)皮)細(xì)胞    RF/6A
大鼠雪旺細(xì)胞    RSC96
豬睪丸細(xì)胞系(ST)    ST
蝙蝠肺細(xì)胞    Tb 1 Lu
小鼠B細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞    W6/32
鼠纖維肉瘤細(xì)胞系    WEHI 164
小鼠B淋巴細(xì)胞    WEHI 231
中文    英文名稱
大鼠垂體細(xì)胞    RPC
小鼠垂體細(xì)胞    MPC
兔子垂體細(xì)胞    
狗垂體細(xì)胞    
鼠肝癌細(xì)胞系    MM45T.Li
小鼠成纖維細(xì)胞系    McCoy
大鼠肝癌細(xì)胞(乳腺癌細(xì)胞接種到肝臟成瘤)    Walker-256
大鼠肝癌細(xì)胞(wistar 大鼠)    CBRH7919
小鼠結(jié)腸癌    C26
穩(wěn)定轉(zhuǎn)染了neor和LIF基因的STO細(xì)胞株    SNL
小鼠艾氏腹水瘤細(xì)胞    ECA
褐鼠胰島素瘤上皮細(xì)胞    RIN-m
小鼠雜交瘤細(xì)胞    ST2/o
小鼠腎癌細(xì)胞    RenCa
小鼠胰島素瘤β細(xì)胞(NOD/Lt轉(zhuǎn)基因小鼠,SV40巨T抗原)    NIT-1
早代小鼠胚胎成纖維細(xì)胞    MEF
中國倉鼠肺細(xì)胞    V79
兔的肝細(xì)胞    VX2
雞胚原代肝細(xì)胞    CEL
129小鼠ES細(xì)胞    D3
129小鼠ES細(xì)胞    E14
BALB/c小鼠ES細(xì)胞    B/c-ES
猴的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞    MSCS
SD大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞    SDBMSC
鼠胸腺激酶缺陷細(xì)胞株    L-MTK
鼠胚成纖維細(xì)胞系    STO
鼠乳腺癌細(xì)胞系    MA-782
鼠成纖維細(xì)胞系    GR
雜交瘤細(xì)胞枝原體陽性    B6YH4
鼠細(xì)胞系    B82
小鼠逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝株 PT-67
小鼠肺上皮細(xì)胞 TC-1
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(高分化) PC-12(Well-differentiated )
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(未分化) PC-12(Undifferentiated)
小鼠腎小球系膜細(xì)胞 SV40-MES-13
小鼠Lewis肺癌細(xì)胞 LLC
中國倉鼠卵巢懸浮細(xì)胞(biohermes) CHO-S
中國倉鼠卵巢細(xì)胞(invitrogen) CHO-S
倉鼠卵巢細(xì)胞,二氫葉酸還原酶缺陷 CHO/dhFr-
小鼠淋巴瘤細(xì)胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)
小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞 MA-891
小鼠宮頸癌細(xì)胞 U14
小鼠胰島素瘤胰島β細(xì)胞 Beta-TC-6
小鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞 TM3
猴腎細(xì)胞 Marc145
小鼠白血病細(xì)胞 P388
大鼠成骨細(xì)胞 ROS1728
非洲綠猴SV40轉(zhuǎn)化的腎細(xì)胞 COS-7
小鼠胚胎細(xì)胞 NIH/3T3
小鼠黑色素瘤細(xì)胞 B16F1
大鼠腎細(xì)胞 NRK-52E
鼠肝星形細(xì)胞 CFSC-8B
鼠肝星形細(xì)胞 CFSC-2G 
人/鼠雜交骨髓瘤細(xì)胞 K6H6/B5
中國倉鼠肺細(xì)胞CHL
大鼠嗜堿性細(xì)胞白血病細(xì)胞RBL-2H3

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