M17人神經(jīng)母細(xì)胞瘤本公司代理美國(guó)ATCC，理德DSMZ，ScienCell德國(guó)細(xì)胞庫(kù)，ECACC,ICLC,DSMZ的細(xì)胞株以及菌株等品牌細(xì)胞。齊一生物大量庫(kù)存ATCC 細(xì)胞，癌細(xì)胞，正常細(xì)胞，*，質(zhì)量保證，公司秉承“誠(chéng)信、專(zhuān)業(yè)、高效"的經(jīng)營(yíng)理念為廣大客戶(hù)服務(wù)。歡迎各位老師！齊一生物科技(上海）有限公司：。Web:www.qiyibio。。ｃｏｍ

M17人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞培養(yǎng)方法 
1、收到細(xì)胞，請(qǐng)查看瓶子是否有破裂，培養(yǎng)基是否漏出，是否渾濁，如有請(qǐng)盡快。
2、收到細(xì)胞，如包裝完好，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀(guān)察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題，細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái)，顯微鏡下觀(guān)察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況，出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí)，請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右，讓細(xì)胞先穩(wěn)定下，再于顯微鏡下觀(guān)察，此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁，請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況 ，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀(guān)察細(xì)胞密度，如為貼壁細(xì)胞，未超過(guò)80%匯合度時(shí)，將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出，留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)：超過(guò)80%匯合度時(shí)，請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞，吸出培養(yǎng)液，1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘，吸出上清，管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4，將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里，存放于4℃冰箱，以備不時(shí)之需。
5 、24小時(shí)后，細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿(mǎn)瓶壁，就可以傳代了。（貼壁細(xì)胞）將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去，加3-5ml（以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn)）PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消化，消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn)，一般1-3分鐘，不超過(guò)5分鐘?？梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁，見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái)，加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞，使之*脫落，然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心，1000rpm/5min。棄上清，視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù)，一般一傳二，如細(xì)胞量多可一傳三，有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀，有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶，以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。（懸浮細(xì)胞）用移液管輕輕吹打瓶壁，直接將溶液吸入離心管離心即可。
6，貼壁細(xì)胞 ，懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí)，換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液，37度    5%CO2 培養(yǎng)
7.  收到細(xì)胞后，請(qǐng)鏡下觀(guān)察細(xì)胞，用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)離心收集細(xì)胞，接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液，使用新鮮配制的培養(yǎng)基，使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞，若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15％去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ，血清濃度還是在10％。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基（含：必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無(wú)機(jī)成分、激素、生長(zhǎng)因子與微量元素）、細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素（P/S）溶液、FBS，適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
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心臟細(xì)胞系統(tǒng)    
人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞    Human Cardiac Microvascular Endothelial Cells
人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞    Human Coronary Artery Endothelial Cells
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞    Human Aortic Endothelial Cells
人主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞    Human Aortic Smooth Muscle Cells
人主動(dòng)脈成纖維細(xì)胞    Human Aortic Fibroblasts
人心肌細(xì)胞    Human Cardiac Myocytes
人心肌細(xì)胞--成人    Human Cardiac Myocytes-adult
人心臟成纖維細(xì)胞    Human Cardiac Fibroblasts
人心臟成纖維細(xì)胞--成人心室    Human Cardiac Fibroblasts-adult ventrical
人心臟成纖維細(xì)胞--成人心房    Human Cardiac Fibroblasts-adult atrial
人心臟成纖維細(xì)胞--成人    Human Cardiac Fibroblasts-adult 
人心臟成纖維細(xì)胞--胎兒心房     Human Cardiac Fibroblasts-fetal atrial 
人心包成纖維細(xì)胞    Human Pericardial Fibroblasts
    
視覺(jué)細(xì)胞系統(tǒng)    
人角膜上皮細(xì)胞    Human Corneal Epithelial Cells
人角膜細(xì)胞    Human Keratocytes
人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞    Human Retinal Endothelial Cells
人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞    Human Retinal Pigment Epithelial Cells
人晶狀體上皮細(xì)胞    Human Lens Epithelial Cells
人虹膜色素上皮細(xì)胞    Human Iris Pigment Epithelial Cells
人結(jié)膜成纖維細(xì)胞    Human Conjunctival Fibroblasts
人無(wú)色素睫裝上皮細(xì)胞    Human Non-Pigment Ciliary Epithelial Cells
人小梁網(wǎng)細(xì)胞    Human Trabecular Meshwork Cells
人眼脈絡(luò)膜成纖維細(xì)胞    Human Ocular Choroid Fibroblasts
人結(jié)膜上皮細(xì)胞    Human Conjunctival Epithelial Cells
    
胎盤(pán)細(xì)胞系統(tǒng)    
人絨毛膜毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞    Human Villus Capillary Endothelial Cells
人羊膜上皮細(xì)胞    Human Amniotic Epithelial Cells
人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞    Human Villous Trophoblasts
人絨毛間充質(zhì)成纖維細(xì)胞    Human Villous Mesenchymal Fibroblasts
脂肪細(xì)胞系統(tǒng)    
人脂肪微血管內(nèi)皮細(xì)胞    Human Adipose Microvascular Endothelial Cells
人前脂肪細(xì)胞--內(nèi)臟    Human Preadipocytes-visceral
人前脂肪細(xì)胞--皮下    Human Preadipocytes-subcutaneous
女性生殖細(xì)胞系統(tǒng)    
人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞    Human Ovarian Microvascular Endothelial Cells
人卵巢表層上皮細(xì)胞    Human Ovarian Surface Epithelial Cells
人卵巢成纖維細(xì)胞    Human Ovarian Fibroblasts
人乳腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞     Human Mammary Microvascular Endothelial Cells 
人乳腺上皮細(xì)胞    Human Mammary Epithelial Cells
人乳腺成纖維細(xì)胞    Human Mammary Fibroblasts    
間充質(zhì)干細(xì)胞系統(tǒng)    
人羊膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞    Human Amniotic Mesenchymal Stromal Cells 
人絨毛膜間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞    Human Chorionic Mesenchymal Stromal Cells 
人間充質(zhì)干細(xì)胞--骨髓    Human Mesenchymal Stem Cells-bone marrow
人間充質(zhì)干細(xì)胞--脂肪    Human Mesenchymal Stem Cells-adipose
人間充質(zhì)干細(xì)胞--肝臟    Human Mesenchymal Stem Cells-hepatic
人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞    Human Umbilical Mesenchymal Stem Cells
人肺間充質(zhì)干細(xì)胞    Human Pulmonary Mesenchymal Stem Cells
人脊椎間充質(zhì)干細(xì)胞    Human Vertebral Mesenchymal Stem Cells
臍帶細(xì)胞系統(tǒng)    
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞    Human Umbilical Vein Endothelial Cells
人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞    Human Umbilical Artery Endothelial Cells
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞    Human Umbilical Vein Smooth Muscle Cells
人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞    Human Umbilical Artery Smooth Muscle Cells