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所 在 地上海市
更新時間:2015-11-18 14:40:06瀏覽次數(shù):98次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線3T3TK小鼠成纖維細胞本公司代理美國ATCC,理德DSMZ,ScienCell德國細胞庫,ECACC,ICLC,DSMZ的細胞株以及菌株等品牌細胞。齊一生物大量庫存ATCC 細胞,癌細胞,正常細胞,*,質(zhì)量保證,公司秉承“誠信、專業(yè)、高效"的經(jīng)營理念為廣大客戶服務。歡迎各位老師!齊一生物科技(上海)有限公司:。Web:www.qiyibio。。com
3T3TK小鼠成纖維細胞細胞培養(yǎng)方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘。可以放入37℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經(jīng)驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度 5%CO2 培養(yǎng)
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
3T3TK 小鼠成纖維細胞
NIH3T3 NIH SWISS 小鼠胚細胞
3T6 小鼠胚胎成纖維細胞
PA317 小鼠胚胎成纖維細胞
Ana-1 小鼠巨噬細胞
SRSV/3T3 SRSV轉(zhuǎn)化的3T3
CTLL-2 小鼠T細胞
CHL 中國倉鼠肺細胞
BRL 肝細胞
NRK 鼠腎細胞
L-6TG 肌母細胞
V79 中國倉鼠肺細胞
BHK 幼倉鼠腎細胞
CHO 中國倉鼠卵巢細胞
R1610 中國倉鼠體細胞
CHO/dhFr- 二氫葉酸還原酶缺陷型CHO細胞
2BS 胚肺細胞
HLF 胚肺細胞
WI-38 胚肺細胞
SL-7 胚肺細胞
XJH B淋巴細胞
L-02 肝細胞
Chang Liver 張氏肝細胞
QSG-7701 小肝細胞
H.A. 羊膜細胞
293 Ad5DNA轉(zhuǎn)化的胚腎細胞
WISH 羊膜細胞
CV-1(M) 非洲綠猴腎
EBTr 牛胚氣管
VERO 非洲綠猴腎
MDBK 牛腎細胞
HepII 猴腎
COS-1 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎
COS-7 SV40轉(zhuǎn)化的非洲綠猴腎
LLC-MK2 恒河猴腎
MLA-144 長臂猿淋巴瘤
B95-8 EBV轉(zhuǎn)化的絨猴白細胞
NISE-Sacy-12 蓖麻蠶卵細胞
ZC-7901 草魚吻端細胞
RF/6A 猴脈絡膜-視網(wǎng)膜細胞(內(nèi)皮)
Mv1Lu 貂肺上皮細胞
Pcc4 胚癌細胞
EL4 淋巴瘤
EL4IL-2 淋巴瘤
P815 肥大細胞瘤
YAC-1 淋巴瘤
MFC 前胃癌
L1210 淋巴白血病
AtT20 垂體瘤
P388D1 淋巴樣瘤
NS-1 骨髓瘤
SP2/0 骨髓瘤
SRS-82 腹水瘤
P3-NS-1/1-Ag4.1 骨髓瘤
SAC-IIB2 腹水瘤
SAC-IIC3 腹水瘤
45.6.TG1.7 骨髓瘤
S180 腹水瘤
P3-X63-Ag8 骨髓瘤
B16 黑色素瘤
J774A.1 單核細胞-巨噬細胞
C127 乳腺腫瘤
RAW264.7 單核細胞-巨噬細胞
F9 胚胎瘤
NG108-15 小鼠神經(jīng)細胞瘤×大鼠神經(jīng)膠質(zhì)細胞雜交細胞
C6 膠質(zhì)瘤
RH-35 肝癌
SHZ-88 乳腺癌
CBRH-7919 肝癌
Rabbit anti-Dog IgG/RBITC 羅丹明標記兔抗狗IgG
Rabbit anti-Rat IgG/RBITC 羅丹明標記兔抗大鼠IgG
HBeAg( HBeAg Mouse Monoclonal Antibody 小鼠抗人乙肝e抗原抗體(1)
HBeAg( HBeAg Mouse Monoclonal Antibody 小鼠抗人乙肝e抗原抗體(1)
HBeAg(Mouse human HbeAg Monoclonal Antibody) 小鼠抗人乙肝e抗原抗體(2)
HBeAg(Mouse human HbeAg Monoclonal Antibody) 小鼠抗人乙肝e抗原抗體(2)
HBeAg(Mouse human HbeAg Monoclonal Antibody) 小鼠抗人乙肝e抗原抗體(2)
URGCP/URG4(Up-regulator of cell proliferation) 乙型肝炎病毒X蛋白(HBxAg)抗體
β-HCG (Human chorionic gonadotropin β ) 抗人β亞基抗體
β-HCG (Human chorionic gonadotropin β ) 抗人β亞基抗體
α-HCG (Human chorionic gonadotropin α ) 抗人α亞基抗體
血友病因子C域抗體
HBV/pre S1/S2 protein 抗乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2抗體
HBV/pre S1/S2 protein 抗乙肝病毒pre S1/乙肝病毒pre S2抗體
β-HCG(Human Chorionic Gonadotropin β) mouse monoclonal antibody 小鼠抗人β亞基單抗
BRI3BP/HCCR-1(BRI3 binding protein) 人宮頸癌基因/bri3結(jié)合蛋白抗體
BRI3BP/HCCR-1(BRI3 binding protein) 人宮頸癌基因/bri3結(jié)合蛋白抗體
α -HCG(Mouse Human Chorionic Gonadotropin α Monoclonal Antibody) 小鼠抗人α 亞基單抗
Hck(hemopoietic cell kinase) 造血細胞激酶抗體
Rabbit anti-guinea pig IgM/RBITC 羅丹明標記兔抗豚鼠IgM
Rabbit anti-bov IgG/RBITC 羅丹明標記兔抗牛IgG
Rabbit anti-bov IgM/RBITC 羅丹明標記兔抗牛IgM
Rabbit anti-chi IgM/RBITC 羅丹明標記兔抗雞IgM
HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱腫瘤抗原抗體
HCN4(Hyperpolarization activated Cyclic Nucleotide-gated channel 4) 環(huán)化核苷酸調(diào)控陽離子通道蛋白亞型4
HCV-Core 丙型肝炎病毒-C區(qū)抗體
HCV-HCBP1/ACY-3(Hepatitis C viruscore- binding protein 1) 丙型肝炎病毒核心蛋白結(jié)合蛋白-1抗體
HCV-NS1 丙型肝炎病毒-NS1抗體
HCV-NS1 丙型肝炎病毒-NS1抗體
Rabbit anti-mouse IgG/RBITC 羅丹明標記兔抗小鼠IgG
Rabbit anti-mouse IgM/RBITC 羅丹明標記兔抗小鼠IgM
Rabbit anti-horse IgG/RBITC 羅丹明標記兔抗馬IgG
Rabbit anti-human IgG/RBITC 羅丹明標記兔抗人IgG
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