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所 在 地上海市
更新時間:2015-11-19 16:52:31瀏覽次數(shù):182次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線人轉移胰腺癌細胞 AsPC-1本公司代理美國ATCC,理德DSMZ,ScienCell德國細胞庫,ECACC,ICLC,DSMZ的細胞株以及菌株等品牌細胞。齊一生物大量庫存ATCC 細胞,癌細胞,正常細胞,*,質量保證,公司秉承“誠信、專業(yè)、高效"的經(jīng)營理念為廣大客戶服務。歡迎各位老師!齊一生物科技(上海)有限公司:。
人轉移胰腺癌細胞 AsPC-1細胞培養(yǎng)方法
1、收到細胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細胞,如包裝完好,請在顯微鏡下觀察細胞。,由于運輸過程中的問題,細胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細胞培養(yǎng)瓶,應立即將培養(yǎng)瓶置于細胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右,讓細胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細胞會重新貼附于瓶壁。如細胞仍不能貼壁,請用臺盼藍染色法鑒定細胞活力,如臺盼藍染色證實細胞活力正常請按懸浮細胞的方法處理
3. 收到細胞時如無異常情況 ,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細胞形態(tài)已恢復并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細胞生長面為準)PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時間以具體細胞為準,一般1-3分鐘,不超過5分鐘??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細胞量多可一傳三,有些細胞不易傳得過稀,有些生長較快的細胞則可以多傳幾瓶,以具體細胞和經(jīng)驗為準。(懸浮細胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細胞 ,懸浮細胞。嚴格無菌操作。換液時,換新的細胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度 5%CO2 培養(yǎng)
7. 收到細胞后,請鏡下觀察細胞,用恰當方式處理細胞。若懸浮的細胞較多,請離心收集細胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進口胎牛血清. 剛接到細胞,若細胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機與無機成分、激素、生長因子與微量元素)、細胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒
人血栓前體蛋白(TpP)ELISA試劑盒
人淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)ELISA試劑盒
人主要組織相容性復合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA試劑盒
人主要組織相容性復合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒
人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA試劑盒
人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA試劑盒
人白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒
A(IgA)ELISA試劑盒
G(IgG)ELISA試劑盒
M(IgM)ELISA試劑盒
人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
人纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒
人血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒
人血栓調節(jié)蛋白(TM)ELISA試劑盒
人血小板衍生生長因子(PDGF)ELISA試劑盒
人血小板活化因子(PAF)ELISA試劑盒
人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA試劑盒
人組織因子(TF)ELISA試劑盒
人β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒
人血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒
人淋巴細胞功能相關抗原2(LFA-2/CD2)ELISA試劑盒
人白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒
人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒
E(IgE)ELISA試劑盒
人髓系細胞觸發(fā)受體-1(TREM-1)ELISA試劑盒
人白細胞調節(jié)素(LR)ELISA試劑盒
人血小板生成素(TPO)ELISA試劑盒
人白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
人Salusin-α ELISA試劑盒
人胰島素受體底物2(IRS-2)ELISA試劑盒
人轉甲狀腺素蛋白(TTR)ELISA試劑盒
人晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)ELISA試劑盒
人胰島淀粉樣多肽(IAPP)ELISA試劑盒
人糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒
人糖化白蛋白(GA)ELISA試劑盒
人甲狀腺結合球蛋白(TBG)ELISA試劑盒
人晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)ELISA試劑盒
人C多肽(CP) ELISA試劑盒
人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)ELISA試劑盒
人胰高血糖素(GC)ELISA試劑盒
人胰多肽(PP)ELISA試劑盒
人胰島素自身抗體(IAA)ELISA試劑盒
人谷氨酸脫羧酶(GAD)ELISA試劑盒
人(TP-5)ELISA試劑盒
└ 前列腺平滑肌細胞總RNA
└ 前列腺成纖維細胞總RNA
└ 甲狀腺濾泡上皮細胞總RNA
└ 胰腺星狀細胞總RNA
骨、關節(jié)、軟組織、皮膚系統(tǒng)
└ 顱蓋造骨細胞總RNA
└ 滑膜細胞總RNA
└ 骨骼肌細胞總RNA
└ 真皮微血管內(nèi)皮細胞總RNA
└ 真皮淋巴上皮細胞總RNA
└ 胎兒表皮角化細胞總RNA
└ 新生兒表皮角化細胞總RNA
└ 成人表皮角化細胞總RNA
└ 胎兒真皮成纖維細胞總RNA
└ 嬰兒真皮成纖維細胞總RNA
└ 成人真皮成纖維細胞總RNA
└ 皮下脂肪細胞總RNA
└ 內(nèi)臟脂肪細胞總RNA
眼、耳、鼻、喉、口腔系統(tǒng)
└ 晶狀體上皮細胞總RNA
└ 角膜上皮細胞總RNA
└ 視網(wǎng)膜色素上皮細胞總RNA
└ 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞總RNA
└ 角膜成纖維細胞總RNA
└ 小梁網(wǎng)細胞總RNA
└ 視網(wǎng)膜muller細胞總RNA
└ 角膜內(nèi)皮細胞總RNA
└ 脈絡膜微血管細胞總RNA
病人腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 食道腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 胃腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 肝腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 結腸腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 直腸腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 肺腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 膽道腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 腎腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 膀胱腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 胰腺腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 甲狀腺腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 前列腺腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 乳腺腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 卵巢腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 子宮腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 宮頸腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 皮膚腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 膠質腫瘤組織源性原代細胞總RNA
└ 髓母細胞腫瘤組織源性原代細胞總RNA
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