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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2015-11-20 16:23:57瀏覽次數(shù):525次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞 293FT
人B淋巴細(xì)胞急性白血病細(xì)胞 BALL-1本公司代理美國ATCC,理德DSMZ,ScienCell德國細(xì)胞庫,ECACC,ICLC,DSMZ的細(xì)胞株以及菌株等品牌細(xì)胞。齊一生物大量庫存ATCC 細(xì)胞,癌細(xì)胞,正常細(xì)胞,*,質(zhì)量保證,公司秉承“誠信、專業(yè)、高效"的經(jīng)營理念為廣大客戶服務(wù)。歡迎各位老師!齊一生物科技(上海)有限公司:
人B淋巴細(xì)胞急性白血病細(xì)胞 BALL-1細(xì)胞培養(yǎng)方法
1、收到細(xì)胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細(xì)胞,如包裝完好,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時(shí)如無異常情況 ,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時(shí),請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。
5 、24小時(shí)后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的胰酶消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過5分鐘??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見細(xì)胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過稀,有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度 5%CO2 培養(yǎng)
7. 收到細(xì)胞后,請鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無機(jī)成分、激素、生長因子與微量元素)、細(xì)胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或青霉素/鏈霉素(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
大鼠游離睪酮(F-TESTO)ELISA 試劑盒
大鼠雄烯二酮(ASD)ELISA 試劑盒
大鼠雌三醇(E3)ELISA 試劑盒
大鼠17羥孕酮(17-OHP)ELISA 試劑盒
大鼠三碘甲狀腺原氨酸(T3)ELISA 試劑盒
大鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA 試劑盒
大鼠游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)ELISA 試劑盒
大鼠新生甲狀腺素(NN-T4)ELISA 試劑盒
大鼠胰島素(INS)ELISA 試劑盒
大鼠C肽(C-Peptide)ELISA 試劑盒
大鼠絨毛膜促性腺激素(CG)ELISA 試劑盒
大鼠促黃體激素(LH)ELISA 試劑盒
大鼠抗心肌抗體(AMA)ELISA 試劑盒
大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA 試劑盒
大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA 試劑盒
大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA 試劑盒
大鼠胰蛋白酶(trypsin)ELISA 試劑盒
大鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)ELISA 試劑盒
大鼠血小板因子3(PF-3)ELISA 試劑盒
大鼠可溶性瘦素受體(sLR)ELISA 試劑盒
大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)ELISA 試劑盒
大鼠艾杜糖硫酸酯酶(IDS)ELISA 試劑盒
大鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)ELISA 試劑盒
大鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA 試劑盒
大鼠腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA 試劑盒
大鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISA 試劑盒
大鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISA 試劑盒
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子4(NT-4)ELISA 試劑盒
大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA 試劑盒
└ 直腸粘膜上皮細(xì)胞總DNA
└ 肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞總DNA
└ 肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞總DNA
└ 肝動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 肝星形細(xì)胞總DNA
└ 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 胃粘膜上皮細(xì)胞總DNA
泌尿系統(tǒng)
└ 腎小球內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 腎近曲管狀上皮細(xì)胞總DNA
└ 腎皮層上皮細(xì)胞總DNA
└ 腎上皮細(xì)胞總DNA
└ 輸尿管上皮細(xì)胞總DNA
└ 腎實(shí)質(zhì)細(xì)胞總DNA
└ 腎系膜細(xì)胞總DNA
└ 膀胱上皮細(xì)胞總DNA
└ 膀胱平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 腎成纖維細(xì)胞總DNA
└ 膀胱成纖維細(xì)胞總DNA
└ 尿道上皮細(xì)胞總DNA
生殖系統(tǒng)
└ 胎盤羊膜細(xì)胞總DNA
└ 胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞總DNA
└ 胎盤絨毛膜細(xì)胞總DNA
└ 子宮平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 子宮成纖維細(xì)胞總DNA
└ 卵巢上皮細(xì)胞總DNA
└ 卵巢成纖維細(xì)胞總DNA
└ 卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞總DNA
血液、淋巴系統(tǒng)
└ 淋巴內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 淋巴成纖維細(xì)胞總DNA
└ 淋巴血管內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 臍帶單核細(xì)胞總DNA
└ 外周血白細(xì)胞總DNA
骨、關(guān)節(jié)、軟組織、皮膚系統(tǒng)
└ 顱蓋造骨細(xì)胞總DNA
└ 滑膜細(xì)胞總DNA
└ 骨骼肌細(xì)胞總DNA
└ 真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 真皮淋巴上皮細(xì)胞總DNA
└ 胎兒表皮角化細(xì)胞總DNA
└ 新生兒表皮角化細(xì)胞總DNA
└ 成人表皮角化細(xì)胞總DNA
└ 胎兒真皮成纖維細(xì)胞總DNA
└ 嬰兒真皮成纖維細(xì)胞總DNA
└ 成人真皮成纖維細(xì)胞總DNA
└ 皮下脂肪細(xì)胞總DNA
└ 內(nèi)臟脂肪細(xì)胞總DNA
BALL-1└ 軟骨細(xì)胞總DNA
└ 表皮黑色素細(xì)胞總DNA
└ 破骨細(xì)胞總DNA
└ 皮膚肥大細(xì)胞總DNA
腦和神經(jīng)系統(tǒng)
└ 腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞總DNA
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