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人皮膚成纖維細(xì)胞 HSF

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品       牌

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更新時(shí)間:2015-11-20 17:07:56瀏覽次數(shù):490次

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人皮膚成纖維細(xì)胞 HSF一、細(xì)胞操作參考書
二、生長特性:貼壁    懸浮
三、細(xì)胞生長條件:
培養(yǎng)基                  90%              (GIBCO)
血清              10%  FBS(GIBCO)
溫度                       37℃
空氣條件      5% CO2,,95% AIR
生長代數(shù)    P4
凍存條件    培養(yǎng)基70%、血清20%、DMSO10%
四、組成:
組份    規(guī)格
細(xì)胞一瓶    T25
細(xì)胞培養(yǎng)與操作說明    1份
五、細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng)
1.如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基,培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡,請及時(shí)實(shí)驗(yàn)室,技術(shù)人員會跟進(jìn)解決
2.貼壁細(xì)胞生長緩慢:適當(dāng)提高血清濃度(zui高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3.生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)

六、細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴(yán)格遵照無菌操作)
1.吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細(xì)胞兩次,加2~3 ml  0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃?-2min)
2.鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6~8ml *培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散
3.取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4.注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存
特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))
1.收到細(xì)胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基,請?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間zui長不宜超過72小時(shí))
2.貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請將細(xì)胞放置培養(yǎng)箱孵育過夜到第二天再做消化傳代
如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時(shí)做好照片記錄并實(shí)驗(yàn)室
└ 腦動脈血管平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 腦靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 腦膜細(xì)胞總DNA
└ 神經(jīng)元細(xì)胞總DNA
└ 神經(jīng)少突前質(zhì)膠質(zhì)細(xì)胞總DNA
└ 神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞總DNA
└ 神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞總DNA
└ 腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 人腦成纖維細(xì)胞總DNA
眼、耳、鼻、喉、口腔系統(tǒng)
└ 晶狀體上皮細(xì)胞總DNA
└ 角膜上皮細(xì)胞總DNA
└ 視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞總DNA
└ 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 角膜成纖維細(xì)胞總DNA
└ 小梁網(wǎng)細(xì)胞總DNA
└ 視網(wǎng)膜muller細(xì)胞總DNA
└ 角膜內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 脈絡(luò)膜微血管細(xì)胞總DNA
病人腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 食道腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 胃腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 肝腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 結(jié)腸腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 直腸腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 肺腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 膽道腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 腎腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 膀胱腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 胰腺腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 甲狀腺腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 前列腺腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 乳腺腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 卵巢腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 子宮腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 宮頸腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 皮膚組織腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 膠質(zhì)腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 髓母細(xì)胞腫瘤組織源性原代細(xì)胞總DNA
└ 胃癌組織源性原代成纖維細(xì)胞總DNA
大鼠,小鼠,兔組織源性原代細(xì)胞總DNA
呼吸系統(tǒng)
└ 肺血管內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 肺血管平滑肌細(xì)胞總DNA
└ Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞總DNA
└ 氣管上皮細(xì)胞總DNA
└ 氣道平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 肺成纖維細(xì)胞總DNA
└ 支氣管上皮細(xì)胞總DNA
└ 支氣管成纖維細(xì)胞總DNA
循環(huán)系統(tǒng)
└ 心肌細(xì)胞總DNA
└ 心肌成纖維細(xì)胞總DNA
└ 主動脈內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 主動脈平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 大隱靜脈平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 冠狀動脈平滑肌細(xì)胞總DNA
消化系統(tǒng)
└ 食管上皮細(xì)胞總DNA
└ 食管平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 腸平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 腸粘膜上皮細(xì)胞總DNA
└ 腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞總DNA
└ 肝動脈內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 肝動脈平滑肌細(xì)胞總DNA
└ 小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
└ 小腸隱窩上皮細(xì)胞總DNA
└ 肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞總DNA
└ 胃粘膜上皮細(xì)胞總DNA
└ 肝竇內(nèi)皮細(xì)胞總DNA
即用PCR擴(kuò)增試劑盒(Pfu)
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長片段PCR擴(kuò)增試劑盒
特定長度產(chǎn)物PCR擴(kuò)增試劑盒 (500 bp)
柱式植物總RNA抽提純化試劑盒
柱式病毒RNA抽提純化試劑盒
柱式RNA快速濃縮純化試劑盒
mRNA純化試劑盒
柱式miRNA PAGE膠回收試劑盒
一管式病毒DNA抽提試劑盒
Dzup基因組DNA快速抽提試劑盒
特定長度產(chǎn)物PCR擴(kuò)增試劑盒 (1000 bp)
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熱啟動熒光定量PCR試劑盒(SYBR染料法)
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UNIQ-10無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA小量提取試劑盒
一管式通用樣品DNA抽提試劑盒
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一管式植物DNA抽提試劑盒
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一管式臨床液體樣品DNA抽提試劑盒
一管式口腔拭子DNA抽提試劑盒
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一管式動物毛發(fā)DNA抽提試劑盒
感受態(tài)制備培養(yǎng)基膠囊
PSG-TS19載體
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UNlQ-500柱式質(zhì)粒DNA大量抽提試劑盒
UNlQ-500柱式質(zhì)粒DNA大量抽提試劑盒
96孔質(zhì)粒DNA小量抽提試劑盒
96孔質(zhì)粒DNA小量抽提試劑盒
SanPrep柱式質(zhì)粒小量抽提試劑盒
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UNlQ-200柱式質(zhì)粒DNA中量抽提試劑盒
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UNlQ-10柱式酵母質(zhì)粒DNA抽提試劑盒
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Dzup(植物)基因組DNA快速抽提試劑盒
Dzup(植物)基因組DNA快速抽提試劑盒
Dzup(植物)基因組DNA快速抽提試劑盒
Dzup(血液)基因組DNA快速抽提試劑盒
UNIQ-10無內(nèi)毒素質(zhì)粒DNA小量提取試劑盒
SanPrep柱式PCR產(chǎn)物純化試劑盒
SanPrep柱式PCR產(chǎn)物純化試劑盒
96孔PCR產(chǎn)物純化試劑盒
96孔PCR產(chǎn)物純化試劑盒
UNIQ-10寡聚核苷酸純化試劑盒
UNIQ-10寡聚核苷酸純化試劑盒
動物基因組DNA快速抽提試劑盒
動物基因組DNA快速抽提試劑盒
血液基因組DNA快速抽提試劑盒

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