人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒 Human apoptosis signal regulating kinase 1,ASK-1 ELISA KIT
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我們的elisa試劑盒具有如下優(yōu)點:
一、高效、靈敏、特異的抗體;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
四、適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型;
五、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費(fèi)。
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人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒 ELISA技術(shù)原理:以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ),將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對底
物的高效催化作用相結(jié)合起來
1. 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。
2. 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性。
3. 酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。
4. 受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。再加入酶標(biāo)記 的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。
5. 此時固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
6. 加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量 與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定 性或定量分析。
測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水 平),并且重復(fù)性好。
我們采用的酶: 辣根過氧化酶(HRP)
1. HRP在蔬菜作物辣根中含量很高。
2. 是一種糖蛋白,含糖量約18%;分子量為44kD。
3. 是一種復(fù)合酶,由主酶(酶蛋白)和輔基(亞鐵血紅素)結(jié)合 而成的一種卟啉蛋白質(zhì)。
4. 主酶為無色糖蛋白,在275nm波長處有zui高吸收峰;輔基是深 棕色的含鐵卟啉環(huán),在403nm波長處有zui高吸收峰。
HRP催化下列反應(yīng):
DH2+H2O2<==HRP==>D+2H2O
上式中DH2為供氫體,H2O2為受氫體。HRP對受氫體的專一 性很高,除H2O2外,僅作用于小分子醇的過氧化物和尿素的過 氧化物。
后者為固體,作為試劑較H2O2方便。許多化合物可作 為HRP的供氫體,在ELISA中常用的供氫體底物為鄰苯二胺(orthopenylenediamine,OPD)、
四甲基聯(lián)苯胺(3,3', 5,5'-tetramethylbenzidine,TMB)和ABTS[2,2'-azino- bis(3-ethyl-benzthiazolinesulfonate-6)]。人凋亡信號調(diào)節(jié)激酶I(ASK-1)ELISA試劑盒
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