蔗糖系列_細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶BAI測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意 ：正式測(cè)定前務(wù)必取2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定
測(cè)定意義：
蔗糖轉(zhuǎn)化酶（Invertase，Ivr）催化蔗糖不可逆地分解為果糖和葡萄糖，是高等植物蔗糖代謝關(guān)鍵酶之一。根據(jù)適 pH，Ivr分為酸性轉(zhuǎn)化酶（AI）和中性轉(zhuǎn)化酶（NI）兩種類型。
AI的適pH為3～5。AI分為可溶性AI(S-AI)和細(xì)胞壁不溶性AI（B-AI）兩種類型。B-AI存在于細(xì)胞間隙并結(jié)合在細(xì)胞壁上，主要參與韌皮部質(zhì)外體卸載時(shí)蔗糖的分解，以維持庫(kù)源之間蔗糖的濃度。
蔗糖系列_細(xì)胞壁不溶性酸性轉(zhuǎn)化酶BAI測(cè)試盒
測(cè)定原理：
B-AI催化蔗糖降解產(chǎn)生還原糖，進(jìn)一步與3,5－二硝基水楊酸反應(yīng)，生成棕紅色氨基化合物，在510nm有特征光吸收，在一定范圍內(nèi)510nm光吸收增加速率與B-AI活性成正比。
自備用品：
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑組成和配制：
提取液1：液體100mL×1瓶，4℃保存;
提取液2：液體100mL×1瓶，4℃保存;
試劑一：液體20mL×1瓶，4℃保存;
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存；臨用前加入10mL試劑一充分溶解備用；用不完的試劑4℃保存;
試劑三：液體15mL×1瓶，4℃保存；
粗酶液提?。?br/>
按照組織質(zhì)量（g）：提取液1體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液1），進(jìn)行冰浴勻漿。12000g 4℃離心10min，棄上清，沉淀中加入1mL蒸餾水，充分震蕩混勻，12000g 4℃離心10min，棄上清，沉淀中加入1mL提取液2 充分混勻，4℃浸提過夜，12000g 4℃離心20min，取上清置冰上待測(cè)。
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