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卡邁舒(上海)生物科技有限公司
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更新時(shí)間:2015-03-04 13:38:54瀏覽次數(shù):152次
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豬流感病毒(FLU)ELISA試劑盒操作步驟:
用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法
1. 包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃ 過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
豬流感病毒(FLU)ELISA試劑盒溫馨說(shuō)明:
1仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)
2確定試劑盒在有效期內(nèi)
3按說(shuō)明書(shū)確定所有試劑齊全(數(shù)量、體積)
4標(biāo)本制備要規(guī)范,每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無(wú)法實(shí)驗(yàn)者,注意低溫保存
5準(zhǔn)備好所有實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等
6根據(jù)檢測(cè)標(biāo)本數(shù)量確定所需試劑的量
7按說(shuō)明書(shū)將所用試劑平衡至室溫,配制所需試劑。
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