小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(BALB/3T3cloneA31)
細(xì)胞介紹
BALB/3T3 clone A31是1968年S.A. Aaronson和 G.T. Todaro 從裂解的14到17 天的BALB/c小鼠胚胎中建立的幾株細(xì)胞之一。細(xì)胞分裂對(duì)接觸抑制特別敏感,生長(zhǎng)需高倍數(shù)稀釋?zhuān)柡蜐舛鹊?,?duì)癌基DNA病毒SV40和小鼠肉瘤病毒高度易感。
細(xì)胞特性
1)來(lái)源:小鼠胚胎,品系:BALB/c
2)形態(tài):成纖維細(xì)胞,貼壁生長(zhǎng)
3)含量:>lxl06個(gè)/mL
4)污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性
5)規(guī)格:T25瓶或者lmL凍存管包裝
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(BALB/3T3cloneA31)
細(xì)胞接受后的處理:
1.收到細(xì)胞后,請(qǐng)檢查是否漏液,如果漏液,請(qǐng)拍照片發(fā)給我們。
2.請(qǐng)先在顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37°C培養(yǎng)約 2-3h〇
3.棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加6ml本公司附帶的*培養(yǎng)基。
4.如果細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)(90%以上)請(qǐng)及時(shí)進(jìn)行細(xì)胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附 帶的*培養(yǎng)基。
5.接到細(xì)胞次日,請(qǐng)檢查細(xì)胞是否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請(qǐng)及時(shí)與我們?nèi)〉谩?br />細(xì)胞用途:僅供科研使用。
小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(BALB/3T3cloneA31)
本公司的細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程,供參考
1)培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1.準(zhǔn)備DMEM培養(yǎng)基(DMEM,GIBC0,貨號(hào)11995-065),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2.培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。溫度:37°C,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3.凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
2)細(xì)胞處理:
復(fù)蘇細(xì)胞:將含有l(wèi)mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37°C水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入lmL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。
注意事項(xiàng):
收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰己揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染, 請(qǐng)立即與我們。
所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作, 并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。