環(huán)保生態(tài)養(yǎng)豬是利用自然環(huán)境中的生物資源，一般是采集土壤中的多種有益微生物，對其進(jìn)行選擇、培養(yǎng)、檢驗(yàn)、擴(kuò)繁，形成有相當(dāng)活力的微生物母種，再按一定比例將母種、鋸木屑、輔助材料、活性劑、食鹽等進(jìn)行混合、發(fā)酵形成有機(jī)墊料。在經(jīng)過特殊設(shè)計(jì)的豬舍里，填上上述有機(jī)墊料，再將豬關(guān)入圈舍。豬排出糞尿被墊料里微生物的活力降解，形成的一種無污染、*的有機(jī)農(nóng)業(yè)技術(shù)。許多養(yǎng)豬戶因此一直不敢使用常規(guī)消對發(fā)酵床進(jìn)行消毒，生怕影響微生物降解能力而造成死床，本試驗(yàn)在大興區(qū)動物衛(wèi)生監(jiān)督管理局支持下，采用2種對其消毒后，通過墊料中的微生物菌落總數(shù)的變化，初步觀察這兩種消對發(fā)酵床微生物的影響效果。

1材料

 1．1試劑與設(shè)備

   牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、硝酸鉀、*、*、淀粉、*、葡萄糖、發(fā)酵床墊料、二氧化氯和威特消毒王。

1．2設(shè)備

  培養(yǎng)箱、壓力消毒鍋、天平等。

1．3樣品

  發(fā)酵床墊料均來自大興區(qū)石垡養(yǎng)豬場。

2方法

  2．1培養(yǎng)基的制作

2．1．1細(xì)菌培養(yǎng)基(牛肉膏培養(yǎng)基)

蛋白胨1．0 g，氯化鈉0．5 g，瓊脂2 g，0．3 g牛肉膏，放入燒杯，加入100 mL雙蒸水，放在電爐上加熱，溶解后用10％氯化鈉調(diào)pH值至7．2～7．6，再定容至100 mL，倒入三角燒瓶，高壓備用。

2．1．2真菌培養(yǎng)基(薩市培養(yǎng)基)

蛋白胨1g，瓊脂2g，倒入燒杯，加雙蒸水定容至100 mL，電爐加熱溶解后，加入4g葡萄糖，溶解后高壓備用。

2．1．3放線菌培養(yǎng)基

硝酸鉀1 g，*0．1 g，*0．5 g，淀粉20g，*0．5g，瓊脂20g，氯化鈉0．5 g，加水1000mL，待加熱溶解后，調(diào)pH值7．2～7．4mL，定容至1000 mL，倒入三角燒瓶，高壓備用。

2．2培養(yǎng)基選擇

取1g消毒前發(fā)酵床墊料，倒入試管，加入l0 mL蒸餾水浸提后(10倍稀釋墊料)，取l00μl加入裝有900 l的雙蒸水試管中，混勻后標(biāo)記試管l(10-1)，依次類推，依次10倍稀釋至2(10 -2)、3(10- 3)、4(10-4)、5(10-5)、6(10-6)、7(10 -7)、8(10-8)、9(10-9)試管中，從7、8、9試管中分別取l00 l涂布在裝有細(xì)菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，每個(gè)樣品用平板涂布重復(fù)3次，然后放入30 °C培養(yǎng)箱，24 h觀察。

2．3消毒實(shí)驗(yàn)步驟

   先用二氧化氯對3個(gè)發(fā)酵床進(jìn)行消毒試驗(yàn)，消毒后前兩天按照消毒0h，4h，8h，20h，48h取樣。每個(gè)時(shí)段每個(gè)發(fā)酵床分別用探頭取發(fā)酵床中間和東南角縱向0cm，-5cm， -15 cm， -30 cm 4個(gè)層面的墊料樣品，按“2．2”操作步驟，取10- 6濃度涂布到細(xì)菌培養(yǎng)基，使用劃線平板計(jì)數(shù)法，測定消毒后各點(diǎn)微生物細(xì)菌總數(shù)的變化。

3結(jié)果

3．1選擇細(xì)菌培養(yǎng)基

   墊料先加入10mL蒸餾水浸提后，再選擇l0-6濃度涂布細(xì)菌、真菌、放線菌三種培養(yǎng)基，結(jié)果顯示：細(xì)菌培養(yǎng)基觀察菌落數(shù)量變化相對穩(wěn)定，效果，隨后按此方法進(jìn)行2．3消毒實(shí)驗(yàn)。

3．2二氧化氯消毒后發(fā)酵床的細(xì)菌總數(shù)的變化

    二氧化氯消毒劑消毒過的發(fā)酵床上的細(xì)菌數(shù)量隨著消毒后時(shí)間的增加，細(xì)菌數(shù)量呈現(xiàn)一個(gè)先下降后上升過程。下降的過程說明是消毒劑起作用殺滅細(xì)菌的過程，上升過程說明，隨著消毒后時(shí)間的延長，消毒劑的作用降低，細(xì)菌開始復(fù)蘇。不同取樣層細(xì)菌數(shù)量在消毒后48 h．分別恢復(fù)到了60％以上。但是不同取樣層細(xì)菌數(shù)量隨著時(shí)間的延長呈現(xiàn)出不同的變化趨勢，0 cm層細(xì)菌數(shù)量變化在消毒后迅速降低，在4 h后降到zui低，隨后開始逐漸增加。而一5 cm和一l5 cm則分別在8h后降到zui低，一15 cm層的墊料中細(xì)菌數(shù)量比一5 cm的變化幅度小。一30 cm層的細(xì)菌數(shù)量在整個(gè)過程中變化不大，普通的消毒對30 cm以下的墊料的細(xì)菌數(shù)量幾乎沒有影響。

3．2威特消毒王消毒后發(fā)酵床的細(xì)菌數(shù)量的變化

    威特消毒王消毒劑消毒過的發(fā)酵床上的細(xì)菌數(shù)量與二氧化氯的變化趨勢相同，隨著消毒后時(shí)間的增加，細(xì)菌數(shù)量呈現(xiàn)一個(gè)先下降后上升過程。不同取樣層細(xì)菌數(shù)量也在消毒后48 h分別恢復(fù)到了70％以上。隨著消毒后取樣時(shí)間墊料的細(xì)菌數(shù)量變化也呈現(xiàn)了與二氧化氯消毒劑相似的變化趨勢。

4討論與分析

4．1  據(jù)墊料微生物菌種選擇培養(yǎng)基

   石垡養(yǎng)豬場發(fā)酵床墊料菌種系我院郭秀山老師提供的土著菌，此菌種結(jié)合當(dāng)?shù)氐耐林⑸锏茸匀毁Y源經(jīng)多次改進(jìn)使用，效果非常好。該菌種情況較為復(fù)雜，主要包含酵母菌、曲霉菌、放線菌、乳酸菌及一些有益的細(xì)菌微生物等，經(jīng)多次采用3種培養(yǎng)皿進(jìn)行菌落培養(yǎng)，放線菌和真菌培養(yǎng)基上菌落數(shù)量少，細(xì)菌培養(yǎng)基菌落數(shù)量相對較穩(wěn)定，是我們測定菌落總數(shù)消長變化的培養(yǎng)基。

4．2消毒的選擇

   消毒劑種類繁多，選擇何種消毒進(jìn)行本次試驗(yàn)，分別考慮了以下3種情況：一是不同類型的病原微生物對不同類型的消毒劑有不同敏感性，盡量選擇不破壞酵母菌的愛迪什、碘伏等消毒進(jìn)行消毒。二是選擇當(dāng)?shù)貏游镄l(wèi)生監(jiān)督*經(jīng)常分送給百姓使用的藥物。三是經(jīng)藥物對比試驗(yàn)，效果較好的消毒，如威特消毒是經(jīng)規(guī)模豬場消毒效果檢測后，因其藥效稀釋倍數(shù)較大、藥效較高、維持時(shí)間較長而被經(jīng)常使用的一種消毒。結(jié)合上述多種情況，zui后按二氧化氯和威特消毒王說明書標(biāo)準(zhǔn)使用量進(jìn)行消毒。

4．3消毒作用分析

   經(jīng)分析，使用二氧化氯和威特消毒王后消毒后，對0 cm，一5 cm，一l5 cm三個(gè)層面的墊料菌數(shù)有些影響，但經(jīng)48 h后細(xì)菌數(shù)量隨著時(shí)間的延長開始復(fù)蘇，至于用其他消毒能不能造成菌落數(shù)量衰退而出現(xiàn)死床現(xiàn)象，還有待于進(jìn)一步研究試驗(yàn)。使用消毒的過程中，如果觀察到墊料對糞便降解能力下降，可及時(shí)噴灑營養(yǎng)劑緩解或清除墊料表層，仍不失為亡羊補(bǔ)牢的辦法。