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人胚腎細(xì)胞

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產(chǎn)品型號

品       牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地南京市

更新時間:2023-02-01 08:21:32瀏覽次數(shù):561次

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產(chǎn)品名稱:人胚腎細(xì)胞
英文名稱:293T
培養(yǎng)基:293T細(xì)胞專用培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS+2mM L-谷氨酰氨
形態(tài):上皮細(xì)胞樣,多角形緊密排列,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長,背景干凈,不產(chǎn)色素,無空泡
生長條件:37℃;5%CO2+95%空氣
生長特性:貼壁生長
儲存方式:液氮
分離基物:胚腎;5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化;女性
本產(chǎn)品僅供科研實驗用,不做其它用途!

產(chǎn)品名稱:人胚腎細(xì)胞

英文名稱:293T

培養(yǎng)基:293T細(xì)胞專用培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS+2mM L-谷氨酰氨

形態(tài):上皮細(xì)胞樣,多角形緊密排列,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長,背景干凈,不產(chǎn)色素,無空泡

生長條件:37℃;5%CO2+95%空氣

生長特性:貼壁生長

儲存方式:液氮

分離基物:胚腎;5型腺病毒及SV40轉(zhuǎn)化;女性

應(yīng)用領(lǐng)域:表達(dá)SV40大T抗原,可用于轉(zhuǎn)染和作為包裝細(xì)胞;用于瞬時轉(zhuǎn)染時可高表達(dá)AP融合蛋白。293細(xì)胞是轉(zhuǎn)染腺病毒E1A基因的人腎上皮細(xì)胞系,293T細(xì)胞由293細(xì)胞派生,同時表達(dá)SV40大T抗原,含有SV40復(fù)制起始點(diǎn)與啟動子區(qū)的質(zhì)??梢詮?fù)制。

傳代方法

復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速沒入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL*培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL*培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰霉0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動時(可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰霉,加入5-6mL*培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時,重復(fù)傳代操作或者凍存。 

 

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