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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地南京市
更新時(shí)間:2023-04-28 17:04:34瀏覽次數(shù):1501次
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產(chǎn)品名稱:小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞
英文名稱:bEnd.3[BEND3]
培養(yǎng)基:DMEM-H*培養(yǎng)基:90%DMEM-H+10%FBS
形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞,長(zhǎng)梭形,多角形,邊緣不規(guī)則,單層貼壁生長(zhǎng),背景干凈,不產(chǎn)色素,無空泡
生長(zhǎng)條件:培養(yǎng)溫度37℃;氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)
儲(chǔ)存方式:液氮
分離基物:bEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是通過轉(zhuǎn)染NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體轉(zhuǎn)化而來的,它表達(dá)了多瘤病毒中T抗原
傳代方法:
復(fù)蘇步驟:①凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出放入PE手套中,迅速?zèng)]入37℃水浴鍋,搖晃凍存管加速溶解,以1min內(nèi)全部溶解為宜;②在超凈臺(tái)中將溶解好的細(xì)胞液加入到裝有9mL*培養(yǎng)基的離心管內(nèi),1000-1200rpm離心5min,棄去上清液,用1-2mL*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。③將細(xì)胞懸液加入到含有5-6mL*培養(yǎng)基的T25瓶中,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代:①將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入1-2mL胰霉(0.25%Trypsin+0.02%EDTA);②鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細(xì)胞層某處,肉眼可見細(xì)胞層脫落,即消化完成,否則繼續(xù)消化),直接吸掉胰霉,加入5-6mL*培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,把細(xì)胞層吹落,吹散。③將細(xì)胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中,添加適當(dāng)?shù)?培養(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。;④注意培養(yǎng)基pH值變化和細(xì)胞密度,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%-90%時(shí),重復(fù)傳代操作或者凍存。
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