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ELISA試劑盒實驗高手不是夢
在操作ELISA試劑盒實驗前,不少教師會找尋很多的相關(guān)實驗資料,網(wǎng)上的資料一大堆,但是真實所能夠需求用到的技巧和注意也就那幾條,嫻熟的了解并把握以后再應(yīng)用到實驗中就會簡略的多。做好這幾條,Elisa試劑盒實驗高手不是夢。
一、加樣的經(jīng)驗總結(jié)
加樣或加試劑時,請注意在汲取標(biāo)本/規(guī)范品,酶物或底物時,*個孔與zui 后一個孔加樣之間的時刻間隔假如太大,將會致使不一樣的 “預(yù)孵育"時刻,然后明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。一次加樣時刻操控 在10分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,引薦運用多道移液器加樣。
二、孵育的三條必知
1.為防止樣品蒸騰,實驗時將反響板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo) 板加上蓋或覆膜,以防止液體蒸騰;
2.洗板后應(yīng)盡快進(jìn)行下步操作,任何時侯都應(yīng)防止酶標(biāo)板處于干燥狀態(tài);
3.一起應(yīng)嚴(yán)格遵守給定的孵育時刻和溫度。
三、ELISA試劑盒洗刷小技巧
洗刷過程中反響孔中殘留的洗刷液應(yīng)在濾紙上充沛拍干,勿將濾紙直 接放入反響孔中吸水,一起要消除板底殘留的液體和手指印,防止影響zui終的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
四、反響時刻的操控
參加底物后請守時調(diào)查反響孔的色彩改變(比方,每隔 10分鐘),如色彩較深,請?zhí)嵩鐓⒓油V挂和V狗错?,防止反響過強(qiáng)然后影響酶標(biāo)儀光密度讀數(shù)。
五、操作說明
1.封板膜只做一次性運用。
2.標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高時先將樣本稀釋必定倍數(shù)后再測定,核算時請zui終乘以稀釋倍數(shù)。
3.各步加樣均運用加樣器,并常常校對其正確性,一次加樣時刻操控在5分鐘內(nèi)。
4.液體標(biāo)本置4℃保留應(yīng)小于1周,-20℃或-80℃均應(yīng)密封保留,-20℃不該超越1個月,-80℃不該超越2個月;標(biāo)本溶血會影響zui終檢查成果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢查。
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