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訪問次數(shù):893更新時間:2019-03-27 11:06:29
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“豬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒”簡介
種屬:人 大鼠 小鼠 雞等
規(guī)格:96T/48T
品牌:RD
保存條件:2-8℃低溫保存
保質(zhì)期:六個月
豬皮質(zhì)醇(Cortisol)ELISA試劑盒的產(chǎn)品優(yōu)點:
1.性價比高——高質(zhì)量,低價格。
2.高效靈活——多個樣品可同時分析,靈活確定分析試樣的數(shù)量。
3.特異性強——優(yōu)選高度特異的配對抗體。
4.操作簡單——96孔預(yù)包被板的完整試劑,實驗時間短。
試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品(480pg/ml) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
- 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
240pg/ml | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
120pg/ml | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
60pg/ml | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
30pg/ml | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
15pg/ml | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
- 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
- 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
- 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
- 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
- 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
- 溫育:操作同3。
- 洗滌:操作同5。
- 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
- 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
- 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。