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上海經(jīng)科化學(xué)科技有限公司


原代細(xì)胞分離試劑盒II

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產(chǎn)品型號(hào)ISO-II

品       牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

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更新時(shí)間：2017-08-13 17:10:16瀏覽次數(shù)：601次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

分離試劑盒編號(hào)：ISO-II
分離試劑盒適用：各種人和哺乳動(dòng)物組織的骨骼肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、肺組織細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及滑膜細(xì)胞的分離。
分離試劑盒規(guī)格：1
分離試劑盒價(jià)格：￥1980
分離試劑盒產(chǎn)地：中國(guó)，PriCells

詳細(xì)介紹

分離試劑盒編號(hào)：ISO-II
分離試劑盒適用：各種人和哺乳動(dòng)物組織的骨骼肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、肺組織細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及滑膜細(xì)胞的分離。
分離試劑盒規(guī)格：1
分離試劑盒價(jià)格：￥1980
分離試劑盒產(chǎn)地：中國(guó)，PriCells
分離試劑盒特征：不含有HIV、HBV、HCV、細(xì)菌、支原體、真菌、酵母；不含有內(nèi)毒素；不含有苯；不含有血清。
 
生物安全級(jí)：1級(jí)。
運(yùn)輸條件：4oC。
儲(chǔ)存條件：4oC，避光。
用途范圍：只可用于科研。
原代細(xì)胞分離試劑盒II  產(chǎn)品說(shuō)明書
一、主要適用
骨骼肌細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、心肌細(xì)胞、肺組織細(xì)胞、軟骨細(xì)胞及滑膜細(xì)胞。
 
二、試劑盒組成
1、Buffer A：    100ml × 2       4℃ 保存
2、Buffer B：     50ml × 2        4℃ 保存
3、Buffer C       50ml × 1         4℃ 保存
4、Buffer D：     20ml × 1        4℃ 保存
5、Buffer E：     20ml × 1        4℃ 保存
6、消化液I：      2ml × 2           4℃ 保存
7、消化液II:      2ml × 1            4℃ 保存
 
三、使用方法
 
注意：使用前請(qǐng)認(rèn)真閱讀說(shuō)明書，按說(shuō)明書的要求對(duì)試劑進(jìn)行妥善保存。
 
本試劑盒供用于5次組織的原代細(xì)胞分離，每次分離的組織約1g。
 
取消化液I 放入50ml Buffer B中，放4℃保存。用完后，再新鮮配制。消化液II放入50ml Buffer C中，放4℃保存。
       
1、取組織重約1g，放入無(wú)菌培養(yǎng)皿中，取1 × PBS（pH7.4）清洗組織，充分去除組織表面的血漬和其它異物。
 
2、將組織轉(zhuǎn)入另一無(wú)菌的培養(yǎng)皿，切去多余組織如脂肪或壞死組織，用無(wú)菌刀  將組織切成1mm3小塊。
 
3、用無(wú)菌彎頭鑷將組織塊轉(zhuǎn)入50ml的無(wú)菌離心管中，讓組織塊沉淀，吸去多余液體，加入10ml Buffer A，充分混勻，300g離心5分鐘，棄上清，如此重復(fù)操作3次。
 
4、用10ml Buffer B重懸組織塊，將組織塊懸液轉(zhuǎn)移至25cm2無(wú)菌培養(yǎng)瓶中， 放置CO2培養(yǎng)箱中，37℃培養(yǎng)24小時(shí)。
 
5用強(qiáng)力吹打使組織分散，將懸液移入15ml無(wú)菌離心管，500g離心5分鐘， 棄上清。
 
6、取10ml Buffer C 懸浮組織塊，置于37℃水浴中30分鐘，每10分鐘搖動(dòng)一次，讓組織塊沉淀。
 
7、取上清放入50ml離心管中，加入1ml Buffer D, 終止反應(yīng)。
 
8、重復(fù)步驟6、7兩次。
 
9、將吸出全部上清進(jìn)行離心，500g離心5分鐘，棄上清。
 
10、取2ml Buffer E懸浮細(xì)胞，用血球計(jì)數(shù)板或電子記數(shù)儀計(jì)數(shù)細(xì)胞，并檢測(cè)細(xì)胞活性。
 
11、懸浮細(xì)胞用相應(yīng)的原代細(xì)胞培養(yǎng)基稀釋，使每毫升培養(yǎng)基中含有1×106個(gè)細(xì)胞，接種培養(yǎng)瓶中，大約每平方厘米2×105個(gè)細(xì)胞。
 

12、每隔2-4天更換一次培養(yǎng)基（以pH變化為標(biāo)準(zhǔn)），觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況。


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