當前位置:上海莼試生物技術有限公司>>細胞生物學試劑>>細胞凋亡與增殖>> WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
貨號 | CS-C6164 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 250T|500T|1000T | 用途 | 僅供科研研究實驗 |
商品介紹:
WST-1 是廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑。WST-1 是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。WST-1是MTT的一種升級替代產品,和MTT或其它MTT 類似產品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。
商品屬性:
貨號 | 規(guī)格 | 貨期 | 英文名稱 |
CS-C6164 | 250T|500T|1000T | 1~3天 |
首先,MTT被線粒體內的一些脫氫酶還原生成的formazan 不是水溶性的,需要有特定的溶解液來溶解;而WST-1和XTT、MTS產生的formazan 都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-1產生的formazan 比XTT和MTS產生的formazan 更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS 更加穩(wěn)定,使實驗結果更加穩(wěn)定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,線性范圍更寬,靈敏度更高??梢杂糜诩毎蜃拥日T導的細胞增殖檢測,也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測等。WST-1 使用時無須同位素,所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內完成。不必洗滌細胞,不必收集細胞,也不必采用額外步驟去溶解formazan。WST-1對細胞無明顯毒性。加入WST-1 顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到佳測定時間。
儲存條件:2-8℃避光保存。
注意:
1.WST-1短期存放于2-8℃,長期存放請分裝后-20℃避光保存。
2.避免反復凍融。
3.凍存后溶解時注意重新混勻。
有效期:一年。
步驟和注意事項:?
準備實驗環(huán)境:?確保實驗區(qū)域清潔,?使用酒精清潔計數板和蓋玻片,?然后用吸水紙輕輕擦干。?
細胞培養(yǎng):?
準備試管或培養(yǎng)皿、?細胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細胞。?
取出保存于低溫下的細胞苗,?并加入培養(yǎng)基中,?搖晃混合均勻。?
用移液管將細胞培養(yǎng)基和細胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?
將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中,?定期更換培養(yǎng)液。?
細胞凍存與復蘇:?
細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中,?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度,?并在此溫度下對其長期保存的過程。?
復蘇則是將凍存的細胞系恢復到常溫的過程,?原則是“慢凍快融",?以較大限度地保存細胞活力。?
細胞計數:?
制備細胞懸液,?使用消化單層培養(yǎng)細胞或收集懸浮培養(yǎng)細胞,?制成單個細胞懸液。?
在顯微鏡下,?用10×物鏡觀察計數板四角大方格中的細胞數,?細胞壓中線時,?只計左側和上方者,?不計右側和下方者。?
熒光顯微鏡使用:?
使用熒光染料對細胞進行染色,?并觀察細胞所發(fā)出的熒光信號,?以研究細胞結構和功能。?
聚合酶鏈反應(?PCR)?:?
準備PCR反應所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?
按照PCR反應液配制表制備反應液。?
在反應器中加入反應液,?開始PCR反應。?
PCR反應的成功與否,?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?
轉染:?
準備轉染所需的載體DNA和細胞。?
制備轉染試劑,?將DNA載體溶解于轉染試劑中,?與細胞混合均勻。?
處理轉染細胞,?并進行下一步實驗。?
在操作過程中,?應注意實驗室安全規(guī)范,?避免隨意丟棄垃圾,?及時登記購買耗材或試劑,?保持實驗環(huán)境的清潔和安全
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