極敏型 ECL化學發(fā)光底物試劑盒 低飛克級靈敏度 發(fā)光信號持久
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上海炎熙生物科技有限公司
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號ECL-N-500
品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時間:2017-08-09 16:09:19瀏覽次數(shù):534次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線增強型ECL化學發(fā)光底物試劑盒是化學發(fā)光系統(tǒng),用于檢測HRP標記的蛋白或核酸,靈敏度高,背景低,檢測靈敏度可達納克級,適于檢測極微量的蛋白或核酸。發(fā)光信號較穩(wěn)定,便于反復曝光。采用對碘*作為發(fā)光增強劑,可明顯減少一抗和二抗的使用量。
增強型 ECL化學發(fā)光底物試劑盒 發(fā)光效率高 信號持久 節(jié)約抗體
增強型 ECL化學發(fā)光底物試劑盒
Enhanced Chemiluminescence Substrate Kit
試劑盒組成:
貨號 | 組份 | 數(shù)量 |
ECL-N-100 | A 液 | 50mL |
B 液 | 50mL | |
說明書 | 1 份 | |
ECL-N-500 | A 液 | 250mL |
B 液 | 250mL | |
說明書 | 1 份 |
儲存:避光置于4 ºC保存,有效期一年。
一、產(chǎn)品簡介:
本試劑盒是化學發(fā)光系統(tǒng),用于檢測固定在膜上的蛋白或核酸,靈敏度高,背景低,檢測靈敏度可達納克(nanogram)級,適用于檢測極微量的蛋白或核酸。發(fā)光信號較穩(wěn)定,便于反復曝光操作。采用對碘*作為發(fā)光增強劑,與普通 ECL 化學發(fā)光底物相比,可明顯減少一抗和二抗的使用量。
二、原理:
增強型ECL化學發(fā)光底物試劑盒用于檢測直接或間接標記辣根過氧化物酶(HRP)的抗體、抗原或者核酸。蛋白質(zhì)或核酸在電泳后轉(zhuǎn)移到印跡膜上,以HRP標記的抗體或探針結合膜上的目的蛋白或核酸,洗膜后置于用本產(chǎn)品配制的ECL工作液中,室溫孵育數(shù)分鐘,HRP使工作液中的魯米諾(Luminol)氧化并發(fā)光,試劑中添加的增強劑可以使得這種發(fā)光增強一千倍。此光經(jīng)X光膠片或者電子裝置感光記錄下來,可清晰顯示蛋白質(zhì)或核酸條帶。
三、產(chǎn)品優(yōu)點:
納克級靈敏度——高靈敏性,能快速檢測廣泛的蛋白范圍,可檢測低達幾納克的蛋白。
信號較穩(wěn)定——發(fā)光時間長,能進行多次曝光,30min仍可保持約60%的發(fā)光強度。
信號強——發(fā)光信號比HRP-魯米諾檢測體系增強一千倍。
穩(wěn)定性高——試劑盒可在4度穩(wěn)定存放一年。
節(jié)約抗體——需要更少(稀釋更多)的一抗和二抗,節(jié)省抗體(*用量:一抗0.2-1.0 μg/mL,二抗10-500 ng/mL)。
四、使用方法:
1. 印跡膜制備:執(zhí)行常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標記的抗體或者HRP標記的核酸探針孵育、洗膜;ECL工作液含有HRP催化的發(fā)光底物,檢測系統(tǒng)必須基于HRP酶標記的抗體或者核酸探針。充分的洗滌對于降低背景非常重要,所有步驟均在室溫下完成。
2. ECL工作液的配置:在使用前取等量A液和B液,混合均勻并盡快使用;將膜片置混合液中,于室溫下孵育約1分鐘,每平方厘米膜片至少使用0.1-0.2 ml以覆蓋全膜片,注意不要在膜片表面形成氣泡。
3.蛋白或核酸信號顯現(xiàn):
1). 用平頭鑷鉗住膜片,垂直置于吸水紙上以吸去過量試劑,僅留下少量液體覆蓋表面,不可讓膜*干燥;
2). 將膜片置于保鮮膜上,吸附蛋白面朝上,小心趕盡氣泡;
3). 用電子裝置感光,或在暗室中用X光片曝光;
4). 根據(jù)信號的強弱適當調(diào)整曝光時間,也可選擇不同時間多次曝光,以達更佳效果。
五、安全性:
無特殊毒性,按普通化學品處理。如果不慎與眼、皮膚和衣物接觸,請立刻用大量清水沖洗。
六、注意事項:
1.由于不同品牌的抗體質(zhì)量不同,以及抗體的保存條件和保存時間的不同,初次使用時建議對抗體用量進行優(yōu)化,以取得更優(yōu)效果。
2.勿將ECL化學發(fā)光底物試劑盒暴露在陽光或強光下,否則會導致其失活;建議保存在棕色瓶中,并避免長時間暴露在陽光下,實驗室光照對試劑盒影響不大;除了X光膠片曝光和洗片處理外,所有步驟均不必在暗室中操作。
3.使用充足的洗滌緩沖液、封閉液、抗體稀釋液和底物工作液去覆蓋印跡膜,以確保印跡膜處于濕潤狀態(tài);使用大量的封閉液和洗滌液能減少非特異性信號的產(chǎn)生。
4.使用前配制ECL工作液,體積足夠覆蓋膜片即可;取A液和B液時一定要用不同的槍頭,互相污染可能導致緩慢失活;配制完畢建議立即使用工作液,室溫放置數(shù)小時后仍可使用但靈敏度略有降低;棄去使用過的混合試劑。
5.印跡膜與ECL工作液孵育后約2 min時發(fā)出的光zui強,然后隨著時間的延長而緩慢減弱,至30 min仍可保持約60%的光信號;蛋白點熒光較弱時可以適當延長曝光時間;使用過少的ECL工作液不利反應進行,為達節(jié)約目的可將膜剪小,但勿降低ECL工作液使用比例。
6.使用*/親和素體系時,避免使用脫脂奶粉作為封閉液,因為脫脂奶粉中含有多種內(nèi)源性*,容易產(chǎn)生非特異性信號。
7. 避免將多張膜置于同一個洗膜盒內(nèi)洗膜,相互吸附或摩擦可能造成很深的背景。
8. 金屬氧化物顆??赡軙斐赡ど铣霈F(xiàn)顆粒狀斑點,避免使用帶有銹跡的剪刀以及鑷子,建議使用塑料的平頭鑷子。
9.*(NaN3)能抑制HRP活性,應避免使用NaN3,如必須使用,濃度不要超過0.01%。
10. 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作;戴手套可以避免在膜上留下手印,保持膜的干凈。
11.本產(chǎn)品僅供研究使用。
增強型 ECL化學發(fā)光底物試劑盒 發(fā)光效率高 信號持久 節(jié)約抗體
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