小鼠肌肝（Cr）ELISA試劑盒?保存方法： 2-8℃（頻繁使用時(shí)）; -20℃（長時(shí)間不用時(shí)）。 
?品牌：子科生物ZIKER?質(zhì)量保證：我告訴所有產(chǎn)品均需要經(jīng)過質(zhì)檢通過后，才允許出庫！
?適用范圍：實(shí)驗(yàn)結(jié)果僅供科研參考，不推薦用于臨床診斷結(jié)果。?ELISA常用的方法：雙抗體夾心法、間接法、競(jìng)爭法以及BAS-ELISA等，子科生物ELISA產(chǎn)品主要用雙抗體夾心法。

ELISA試劑盒的基本原理
就是將抗原抗體固定到特定的載體上進(jìn)行反應(yīng)，并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的形式顯現(xiàn)出來。
（1）將抗原抗體反應(yīng)固相化：即試驗(yàn)中的包被環(huán)節(jié)，使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機(jī)制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團(tuán)可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu)，保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性；
（2）封閉：固相吸附蛋白是非特異性的，在包被目的免疫蛋白后，未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力，為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性，因此，包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑，也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
（3）抗原抗體反應(yīng)：抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進(jìn)行特異的抗原抗體反應(yīng)。 （4）酶反應(yīng)：酶可以通過共價(jià)鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物，當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時(shí)候，被檢測(cè)靶目標(biāo)中也結(jié)合了酶分子。
（5）ELISA試劑盒底物反應(yīng)：結(jié)合在抗原抗體中的酶分子，可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng)，檢測(cè)人員可以裸眼觀察，可以通過顏色來判定是否有免疫反應(yīng)的存在，通過顏色的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量，也可借用酶標(biāo)儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。

小鼠肌肝（Cr）ELISA試劑盒試劑組成
包被平底微孔板,酶結(jié)合物,生物素,標(biāo)準(zhǔn)品,顯色劑A,顯色劑B,終止液,濃縮洗滌液(100倍稀釋)。

自備物品
1.酶標(biāo)儀(盡量提前預(yù)熱)
2.微量加液器、吸頭
3.蒸餾水或去離子水以及濾紙

注意事項(xiàng)
1.試劑準(zhǔn)備：所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫，使用后請(qǐng)立即按照說明書要求保存。實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2．加樣：加樣時(shí)，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔之見的時(shí)間間隔過大，否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間，從而影響實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性以及重復(fù)性；一般加樣時(shí)間控制在10分鐘內(nèi)，如果樣本數(shù)量過多，可使用多道移液器。
3.孵育：樣品要在密閉的容器內(nèi)進(jìn)行孵育，嚴(yán)格按照說明書上規(guī)定的孵育時(shí)間和溫度進(jìn)行。
4.洗滌：洗滌過程中反應(yīng)孔中的殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上充分拍干，同時(shí)要消除板底殘留的液體和手指痕跡，避免影響zui后的酶標(biāo)儀讀數(shù)。
5.反應(yīng)時(shí)間的控制：加入底物后請(qǐng)定時(shí)觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如，10分鐘左右)，如果顏色較深，請(qǐng)?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng)。
6.建議實(shí)驗(yàn)前預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，計(jì)算結(jié)果時(shí)乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
7.建議使用本試劑盒時(shí)先做預(yù)實(shí)驗(yàn)(即先做標(biāo)準(zhǔn)曲線，試用幾個(gè)標(biāo)本)，如果對(duì)本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商，如果因運(yùn)輸過程導(dǎo)致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔(dān)產(chǎn)品本身以外的任何損失。

操作步驟
1. 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2. 取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品，空白對(duì)照加入50μl的蒸餾水；
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對(duì)照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5. 在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；(不含空白對(duì)照孔)
6. 將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時(shí)；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干；
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對(duì)照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；
11.各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；

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